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Semrock BrightLine單/多波段LED濾光片組-1
Semrock BrightLine單/多波段LED濾光片組-1
從今天市場上受歡迎的led光源的光譜開始,設(shè)計這個濾光片系列,。與傳統(tǒng)的用于標準寬頻光源(如水銀或氙氣燈)的傳統(tǒng)濾光片組相比,,這些濾光片可顯著改善熒光信號。
這些濾光片組被優(yōu)化,,以同時傳送最亮的信號和最高信噪比(對比度),,可用于使用基于LED的光引擎成像各種熒光團,。
?光譜與流行的LED光引擎對齊
?與傳統(tǒng)光源相比,,在使用led光引擎時,每個通道的信號比傳統(tǒng)光源多10倍到100倍
?該系列中的常見激發(fā)濾光片簡化了不同設(shè)置配置的可視化
BrightLine Single-band LED Filter Sets
BrightLine單波段LED濾光片組
濾光片組/主要熒光 | 激發(fā)(CWL/BW) | 發(fā)射(CWL/BW) | 二向色(邊緣) | 濾光片組零件號/零組零件編號 |
LED-DAPI-A DAPI, Alexa Fluor® 405, BFP, Pacific BlueTM | 392/23 | 447/60 | 409 nm | LED-DAPI-A-000 LED-DAPI-A-000-ZERO |
LED-CFP-A CFP (ECFP), Cerulean, SYTOX Blue, TagCFP | 438/24 | 483/32 | 458 nm | LED-CFP-A-000 LED-CFP-A-000-ZERO |
LED-FITC-A FITC (Fluorescein), GFP (EGFP), Cy2TM, 5-FAM | 474/27 | 525/45 | 495 nm | LED-FITC-A-000 LED-FITC-A-000-ZERO |
LED-YFP-A YFP (EYFP), Venus, Fluo-3, Rhodamine 123 | 509/22 | 544/24 | 526 nm | LED-YFP-A-000 LED-YFP-A-000-ZERO |
LED-TRITC-A TRITC, SpectrumOrange, dTomato, mTangerine | 554/23 | 609/54 | 573 nm | LED-TRITC-A-000 LED-TRITC-A-000-ZERO |
LED-mCherry-A mCherry, TexasRed, mKate, mRFP1 | 578/21 | 641/75 | 596 nm | LED-mCherry-A-000 LED-mCherry-A-000-ZERO |
LED-Cy5-A Cy5TM, Alexa Fluor® 647, APC | 635/18 | 680/42 | 652 nm | LED-Cy5-A-000 LED-Cy5-A-000-ZERO |
全波段LED濾光片組–多頻激發(fā)器,,發(fā)射器和分束器
濾光片組/主要熒光 | 多通帶激發(fā)(CWL/BW) | 多通帶發(fā)射(CWL/BW) | 多邊緣二向色 | 濾光片組零件號 |
LED-DA/FI/TR/Cy5-A (Quad-band Full Multiband) | LED-DA/FI/TR/Cy5-A-000 | |||
Blue: DAPI, BFP, Alexa Fluor® 405 Green: FITC (Fluorescein), GFP (EGFP), Alexa Fluor® 488 Orange: TRITC, DsRed, dTomato, mRFP Red: Cy5TM, APC, Alexa Fluor® 647 | 392/23 474/27 554/23 635/18 | 432/36 515/30 595/31 730/139 | 409 nm 493 nm 573 nm 652 nm | LED-DA/FI/TR/Cy5-A-000- ZERO |
回顧Semrock在2015年8月BioOptics World上發(fā)表的文章
優(yōu)化LED光引擎的成像性能越來越受到熒光顯微鏡的青睞,,但是標準濾光片組,包括與光源一起包裝的濾光片通常限制了它們的性能,。但是,,通過一些過濾器選擇指南,可以輕松獲得明亮,,干凈的圖像,。
“平克爾"多頻帶LED濾光片組-單頻激發(fā)器,一個三或四波段發(fā)射器,,和一個多分束器
濾光片組/主要熒光 | 單波段激發(fā)(CWL/BW) | 多通帶發(fā)射(CWL/BW) | 多邊緣二向色 | 濾光片組零件號 |
LED-DA/FI/TX-3X-A (Triple-band Pinkel Set) | LED-DA/FI/TX-3X-A-000 | |||
Blue: DAPI, BFP (EBFP), Alexa Fluor® 405 Green: FITC (Fluorescein), GFP (EGFP),Cy2TM Red: Texas Red, mCherry, 5-ROX | Ex1: 392/23 Ex2: 474/27 Ex3: 575/25 | 432/36 523/46 702/196 | 409 nm 493 nm 596 nm | LED-DA/FI/TX-3X-A-000-ZERO |
LED-CFP/YFP/mCherry-3X-A (Triple-bandPinkelSet) | LED-CFP/YFP/mCherry-3X-A000 | |||
Cyan: CFP (ECFP), Cerulean, SYTOX Blue, TagCFP Yellow: YFP (EYFP), Venus, Fluo-3, Rhodamine 123 Red: mCherry, TexasRed, mKate, mRFP1 | Ex1: 438/24 Ex2: 509/22 Ex3: 578/21 | 475/22 543/22 702/197 | 459 nm 526 nm 596 nm | LED-CFP/YFP/mCherry-3X-A-000-ZERO |
LED-DA/FI/TR/Cy5-4X-A (Quad-band Pinkel Set) | LED-DA/FI/TR/Cy5-4X-A-000 | |||
Blue: DAPI, BFP (EBFP), Alexa Fluor® 405 Green: FITC (Fluorescein), GFP (EGFP), Alexa Fluor® 488 Orange: TRITC, DsRed, dTomato, mRFP Red: Cy5TM, APC, Alexa Fluor® 647 | Ex1: 392/23 Ex2: 474/27 Ex3: 554/23 Ex4: 635/18 | 432/36 515/30 595/31 730/139 | 409 nm 493 nm 573 nm 652 nm | LED-DA/FI/TR/Cy5-4X-A-000-ZERO |
“Sedat"多通帶LED濾光片組-單頻帶激發(fā)器和發(fā)射器,,以及一個多邊分束器
濾光片組/主要熒光 | 單波段激發(fā)(CWL/BW) | 單波段發(fā)射 (CWL/BW) | 多邊緣二向色 | 濾光片組型號 |
LED-DA/FI/TX-3X3M-A (Triple-band Sedat Set) Blue: DAPI, BFP (EBFP), Alexa Fluor® 405 Green: FITC (Fluorescein), GFP (EGFP), Cy2TM Red: Texas Red, mCherry, 5-ROX | Ex1: 392/23 Ex2: 474/27 Ex3: 575/25 | Em1: 433/24 Em2: 525/45 Em3: 641/75 | 409 nm 493 nm 596 nm | LED-DA/FI/TX-3X3M-A-000 |
LED-CFP/YFP/mCherry-3X3M-A (Triple-band Sedat Set) Cyan: CFP (ECFP), Cerulean, SYTOX Blue, TagCFP Yellow: YFP (EYFP), Eosin, Fluo-3, Rhodamine 123 Red: mCherry, TexasRed, mKate, mRFP1 | Ex1: 438/24 Ex2: 509/22 Ex3: 578/21 | Em1: 482/25 Em2: 544/24 Em3: 641/75 | 459 nm 526 nm 596 nm | LED-CFP/YFP/mCherry-3X3M-A-000 |
LED-DA/FI/TR/Cy5-4X4M-A (Quad-band Sedat Set) Blue: DAPI, BFP (EBFP), Alexa Fluor® 405 Green: FITC (Fluorescein), GFP (EGFP), Alexa Fluor® 488 Orange: TRITC, DsRed, dTomato, mRFP Red: Cy5TM, APC, Alexa Fluor® 647 | Ex1: 392/23 Ex2: 474/27 Ex3: 554/23 Ex4: 635/18 | Em1: 433/24 Em2: 520/35 Em3: 600/37 Em4: 680/42 | 409 nm 493 nm 573 nm 652 nm | LED-DA/FI/TR/Cy5-4X4M-A-000 |
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多波段熒光濾光片,,具有通帶、邊緣陡度和阻滯性能,,可與最佳單波段濾光片相媲美,,并且具有硬鍍膜的優(yōu)異“抗燒毀"耐久性。事實上,,在每一個BrightLine濾光片組中的濾光片,,包括這些多波段的濾光片,都是用同樣的耐用的硬鍍膜技術(shù)制成的,。
光學濾光片簡介
濾光片選擇性地透射光譜的一部分,,同時拒絕透射其余部分。愛特蒙特光學的光學濾光片常用于顯微鏡,、光譜學,、化學分析和機器視覺,可提供各種過濾類型和精度等級,。本應(yīng)用筆記介紹了用于制造愛特蒙特光學濾光片的不同技術(shù),、一些關(guān)鍵規(guī)范的定義以及愛特蒙特光學提供的各種濾光片的描述。
光學濾光片關(guān)鍵術(shù)語
雖然濾光片與其他光學組件有許多相同的規(guī)范,,但是為了有效地了解并確定哪種濾光片適合您的應(yīng)用,,應(yīng)該了解濾光片中的許多特定規(guī)范。
中心波長 (CWL)
用于定義帶通濾光片的中心波長描述頻譜帶寬的中點,,濾光片在此之上傳輸,。傳統(tǒng)的鍍膜光學濾光片傾向于在中心波長附近達到大的透射率,而鍍加硬膜的光學濾光片往往在光譜帶寬上有相當平坦的傳輸輪廓,。
帶寬
帶寬是一個波長范圍,,用于表示頻譜通過入射能量穿過濾光片的特定部分。帶寬又稱為FWHM(圖1),。
圖 1: 中心波長和半峰全寬說明
半峰全寬 (FWHM)
FWHM
描述帶通濾光片將傳輸?shù)念l譜帶寬,。該帶寬的上限和下限是在濾光片達到大透射率的 50% 時的波長下定義的。例如,,如果濾光片的大透射率是 90%,,那么濾光片達到透射率之 45% 時的波長將定義 FWHM 的上限和下限。10 納米或更低的 FWHM 被認為是窄帶,,通常用于激光凈化和化學檢測,。25-50 納米的 FWHM 經(jīng)常用于機器視覺應(yīng)用,;超過 50 納米的 FHWM 被認為是寬帶,通常用于熒光顯微鏡應(yīng)用,。
截止范圍
阻斷范圍是用于表示通過濾光片衰減的能量光譜區(qū)域的波長間隔(圖2),。阻斷程度通常會在光密度中定。
圖 2: 截止范圍說明
斜率
斜率是通常在邊緣濾光片上定義的規(guī)范,,如短波通或長波通濾光片,,用來描述濾光片從高截止轉(zhuǎn)換為高透射率的帶寬??梢詮母鞣N起點和終點定斜率,,作為截止波長的百分比。愛特蒙特光學有限公司通常將斜率定義為從 10% 傳輸點到 80% 傳輸點的距離,。例如,,將期望具有 1% 斜率的 500 納米長波通濾光片在 5 納米(500 納米的 1%)帶寬上從 10% 的透射率轉(zhuǎn)換為 80% 的透射率。
光密度(OD)
光密度描述被濾光片阻斷或拒絕的能量量,。高光密度值表示低透射率,,低光密度則表示高透射率。6.0或更大的光密度用于兩端的阻斷需求,,如拉曼光譜或熒光顯微鏡,。3.0-4.0的光密度是激光分離和凈化、機器視覺和化學檢測的理想選擇,,而 2.0 或更少的光密度是顏色排序和分離光譜順序的理想選擇,。
圖3:光密度說明
二向色性濾光片
二向色性濾光片是用于取決于波長透射率或反射光的濾光片類型;特定波長范圍透射的光則鑒于不同范圍的光線反射或吸收(圖4),。二向色性濾光片常用于長波通和短波通應(yīng)用,。
圖4:二向色性濾光片鍍膜說明
起始波長
起始波長是用于表示在長波通濾光片中透射率增加至50%波長的術(shù)語。起始波長由圖5中的λcut-on起始表示,。
圖 5:起始波長說明
截止波長
截止波長是用于表示在短波通濾光片中透射率降低至50%波長的術(shù)語。截止波長由圖6中的λcut-off截止表示,。
圖6:截止波長說明
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