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色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相以及色譜柱的制備和操作條件
閱讀：684 發(fā)布時(shí)間：2022-12-26
色譜柱可分為填充柱和開(kāi)管柱兩大類,。多為金屬或玻璃制作。有直管形,、盤(pán)管形,、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱,。
色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,，以及色譜柱的制備和操作條件。
色譜是一種分離分析手段,，分離是核心,，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對(duì)色譜柱的要求是柱效高,、選擇性好,，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相,、氧化鋁,、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹(shù)脂)、多孔碳等,，其粒度一般為3,5,7,10μm等,，柱效理論值可達(dá)5~16萬(wàn)/米。對(duì)于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對(duì)于同系物分析,，只要500即可;對(duì)于較難分離物質(zhì)對(duì)則可采用高達(dá)2萬(wàn)的柱子,，因此一般10~30cm左右的柱長(zhǎng)就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要,。
柱效受柱內(nèi)外因素影響，為使色譜柱達(dá)到最佳效率,，除柱外死體積要小外,，還要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù)。即使好的裝填技術(shù),，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,，靠近管壁的部位比較疏松，易產(chǎn)生溝流,，流速較快,，影響沖洗劑的流形，使譜帶加寬,，這就是管壁效應(yīng),。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,，柱外效應(yīng)對(duì)柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng),。