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小鼠血小板內皮細胞粘附因子（AST）ELISA檢測試劑盒

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被大鼠白介素4(IL-4)捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠白介素4(IL-4)呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度。

樣品收集,、處理及保存方法

1.  血清：使用不含熱原和內毒素的試管,，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后,，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉離心30分鐘取上清,。

3.  細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉離心10分鐘取上清,。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝,，凍存于-20℃,，避免反復凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

• 酶標儀（450nm）
• 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL
• 37℃恒溫箱

小鼠血小板內皮細胞粘附因子（AST）ELISA檢測試劑盒

操作注意事項

1.   試劑盒保存在2-8℃,，使用前室溫平衡20分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正?，F(xiàn)象,，水浴加熱使結晶*溶解后再使用。
2.   實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,，密封（低溫干燥）保存,。
3.   預處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可,。
4.   嚴格按照說明書中標明的時間,、加液量及順序進行溫育操作。
5.   所有液體組分使用前充分搖勻,。