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當(dāng)前位置:斯譜瑞(上海)生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>如何改進ELISA試劑盒實驗中的錯誤
ELISA試劑盒有許多實驗操作步驟,,新手操作難免出錯,。其中許多錯誤是由不充分的細節(jié)造成的,。有很多方法可以減少這種錯誤,,比如在做實驗時少說話,,以防止唾液掉進酶的標(biāo)簽中,。當(dāng)然,我們也要學(xué)會探索自己的問題,,找出原因,。那么,我們?nèi)绾胃倪MELISA試劑盒實驗中的錯誤呢?
1,、評價試劑的實用性
試劑的穩(wěn)定性對準(zhǔn)確度非常重要,。在啟用ELISA試劑盒之前,應(yīng)重復(fù)檢測陰性和陽性對照品和樣品,,試劑僅在試劑符合要求后才能使用,。
2、操作前仔細閱讀ELISA試劑盒說明書
嚴(yán)格按照說明書要求進行標(biāo)準(zhǔn)化操作,。不同批號的試劑不混合,。值得改進的是,只有經(jīng)過反復(fù)的試驗,,如洗盤的數(shù)量,,才能加以改進,。
3、加樣要準(zhǔn)確,、快速
樣品添加的不準(zhǔn)確度和酶制劑用量的不確定度直接影響顯色效果,。此外,顯色深度和A值的確定與顯色劑和最終液體的加入量有關(guān),,因此樣品的裝載應(yīng)謹慎,。需要在一定時間內(nèi)完成采樣的實驗,如果采樣速度慢,,會出現(xiàn)誤差,,試劑會暴露很長時間,特別是當(dāng)室溫過高時,,保質(zhì)期會縮短甚至失效,。
4、檢驗技術(shù)人員應(yīng)具備實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗,。
檢測技術(shù)人員能夠熟練操作實驗儀器儀表,,具有一定的總結(jié)和分析問題的能力,能及時,、妥善地解決ELISA試劑盒實驗中出現(xiàn)的意外情況,。
5、洗滌要絕對干凈
洗版不干凈,,酶偶聯(lián)物的背景顏色為假陽性,。此外,清潔劑應(yīng)該是新鮮的,,可以隨時使用,。舊的洗滌劑會增加背景,也可能出現(xiàn)假陽性,。
6,、嚴(yán)控ELISA試劑盒實驗反應(yīng)時間
ELISA試劑盒反應(yīng)時間過長,酶被滅活,,反應(yīng)時間過短,,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能全部結(jié)合,產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定,,易清洗,,易產(chǎn)生假陰性。
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