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當(dāng)前位置:斯譜瑞(上海)生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>ELISA試劑盒檢測不成功的原因
elisa試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附試驗,,它是一種常用的固相酶免疫測定辦法,由于ELISA辦法靈敏,特異性強不需要特殊設(shè)備,
所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。但ELISA測定中影響因 素較多,,并且其操作中有必定的技能要求,,
在臨床查驗中除正常反響外,有時??梢姷揭恍╁e誤效果!
溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清選用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性,。或許是溶血血清中含有過 氧化酶物質(zhì),
在洗滌過程中往往難以全部洗脫,,它可使 H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),,然后催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),
即顯藍(lán)色,, 產(chǎn)生假陽性.標(biāo)本受細(xì)菌污染,。因菌體中或許含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因而,,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同 溶血標(biāo)本一樣,,
亦可產(chǎn)生非特異性顯色而攪擾測定效果。
標(biāo)本保存不妥,。在冰箱中保存過久的標(biāo)本,,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、形成 假陽性,;為打敗上述攪擾,,
ELISA試劑盒測定的血清標(biāo)本宜為新鮮搜集,;如不能當(dāng)即測定,,5 d 內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,
1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存,;凍存后融解的標(biāo)本,,蛋白 質(zhì)部分濃縮,分布不均,,應(yīng)充分混合后再測定,,
但混勻時應(yīng)輕柔,不行激烈振動,。
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