當前位置:青旗(上海)生物技術發(fā)展有限公司>>細胞庫>>細胞系>> 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞MuM-2C
參 考 價 | 面議 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 |
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貨號 | BFN608006384 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
主要用途 | 僅供科研 |
細胞名稱 | 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞MuM-2C | ||
貨物編碼 | BFN608006384 | ||
產品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數(shù)量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研 2類 |
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%雙抗(Hyclone) | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞MuM-2C取自女性供體,,貼壁培養(yǎng),。倍增時間64h. | ||
注釋 | Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a M14 derivative (PubMed=28940260). Originally thought to originate from a female patient with metastatic uveal melanoma. Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00501. | ||
STR信息 | Amelogenin:X;CSF1PO:11,;D13S317:12,;D16S539:9;D18S51:13,,18,;D19S433:14,15,;D21S11:30,;D2S1338:19;D3S1358:14,,16,;D5S818:11,12,;D7S820:8,,10;D8S1179:13,;FGA:21,;TH01:6,7,;TPOX:8,,11;vWA:18,; | ||
參考文獻 | PubMed=12067204; DOI=10.1023/A:1015591624171 Seftor E.A., Meltzer P.S., Kirschmann D.A., Pe'er J., Maniotis A.J., Trent J.M., Folberg R., Hendrix M.J.C. Molecular determinants of human uveal melanoma invasion and metastasis. Clin. Exp. Metastasis 19:233-246(2002)
PubMed=15299072 Qin J.-Z., Stennett L., Bacon P., Bodner B., Hendrix M.J.C., Seftor R.E.B., Seftor E.A., Margaryan N.V., Pollock P.M., Curtis A., Trent J.M., Bennett F., Miele L., Nickoloff B.J. p53-independent NOXA induction overcomes apoptotic resistance of malignant melanomas. Mol. Cancer Ther. 3:895-902(2004)
PubMed=18689700; DOI=10.1167/iovs.08-2324 Folberg R., Kadkol S.S., Frenkel S., Valyi-Nagy K., Jager M.J., Pe'er J., Maniotis A.J. Authenticating cell lines in ophthalmic research laboratories. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49:4697-4701(2008)
PubMed=22236444; DOI=10.1111/j.1755-148X.2012.00971.x Griewank K.G., Yu X., Khalili J., Sozen M.M., Stempke-Hale K., Bernatchez C., Wardell S., Bastian B.C., Woodman S.E. Genetic and molecular characterization of uveal melanoma cell lines. Pigment Cell Melanoma Res. 25:182-187(2012)
PubMed=28940260; DOI=10.1002/ijc.31067 Korch C., Hall E.M., Dirks W.G., Ewing M., Faries M., Varella-Garcia M., Robinson S., Storts D.R., Turner J.A., Wang Y., Burnett E.C., Healy L., Kniss D., Neve R.M., Nims R.W., Reid Y.A., Robinson W.A., Capes-Davis A. Authentication of M14 melanoma cell line proves misidentification of MDA-MB-435 breast cancer cell line. Int. J. Cancer 142:561-572(2017) |
驗收細胞注意事項
1,、收到 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞MuM-2C細胞,請查看瓶子是否有破裂,,培養(yǎng)基是否漏出,,是否渾濁,,如有請盡快聯(lián)系。
2,、收到 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞MuM-2C細胞,,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞,。,由于運輸過程中的問題,,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,,出現(xiàn)此狀態(tài)時,,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右,,讓細胞先穩(wěn)定下,,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁,。如細胞仍不能貼壁,,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理,。
3,、收到 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞MuM-2C細胞后,請鏡下觀察細胞,,用恰當方式處理細胞,。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中,。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,,使用進口胎牛血清,。剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到 15%去培養(yǎng),。若細胞迏到 80%左右 ,,血清濃度還是在 10%。
4,、收到 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞MuM-2C細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,,如為貼壁細胞,,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,,留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過 80%匯合度時,,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,,1000 轉/分鐘離心 3 分鐘,,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶,。
5,、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松,。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,,存放于 4℃冰箱,以備不時之需,。
6,、24 小時后, 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞MuM-2C細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁,,即可傳代,。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加 3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去,。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,,消化時間以具體細胞為準,一般 1-3 分鐘,,不超過 5 分鐘,。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化,。輕輕晃動瓶壁,,見細胞脫落下來,加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化,。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,,1000rpm/5min,。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),,一般一傳二,,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,,以具體細胞和經(jīng)驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,,直接將溶液吸入離心管離心即可,。
7,、貼壁細胞 ,懸浮細胞,。嚴格無菌操作,。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,,37℃,,5%CO2 培養(yǎng)。
特別提醒: 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,,請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng),。
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