4006560232
當前位置：青旗（上海）生物技術發(fā)展有限公司>>細胞庫>>細胞系>> 人黑色素瘤細胞UKRV-Mel-15a
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BFN60804025 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研 |
細胞名稱 | 人黑色素瘤細胞UKRV-Mel-15a |
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貨物編碼 | BFN60804025 | ||
產品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研 2類 | ||
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 該細胞取自女性患者。 | ||
注釋 | To cite this cell line use: UKRV-Mel-15a (RRID:CVCL_A713),。該細胞引種自ESTDAB | ||
STR信息 | Amelogenin X CSF1PO 11 D3S1358 15,16 D5S818 11 D7S820 8,12 D13S317 11,12 FGA 21,22 TH01 6 TPOX 8,12 vWA 15,17 | ||
參考文獻 | PubMed=10594685; DOI=10.1046/j.1365-2567.1999.00902.x Sun Y., Moller P., Berking C., Schlupen E.-M., Volkenandt M., Schadendorf D. In vivo selective expansion of a tumour-specific cytotoxic T-cell clone derived from peripheral blood of a melanoma patient after vaccination with gene-modified autologous tumour cells. Immunology 98:535-540(1999)
PubMed=15592718; DOI=10.1007/s00262-004-0561-5 Rodriguez T., Mendez R., Roberts C.H., Ruiz-Cabello F., Dodi I.A., Lopez Nevot M.A., Paco L., Maleno I., Marsh S.G.E., Pawelec G., Garrido F. High frequency of homozygosity of the HLA region in melanoma cell lines reveals a pattern compatible with extensive loss of heterozygosity. Cancer Immunol. Immunother. 54:141-148(2005)
PubMed=23851445; DOI=10.1158/1541-7786.MCR-13-0006 Dahl C., Christensen C., Jonsson G., Lorentzen A., Skjodt M.L., Borg A., Pawelec G., Guldberg P. Mutual exclusivity analysis of genetic and epigenetic drivers in melanoma identifies a link between p14 ARF and RARbeta signaling. Mol. Cancer Res. 11:1166-1178(2013) | ||
驗收細胞注意事項
1,、收到人黑色素瘤細胞UKRV-Mel-15a，請查看瓶子是否有破裂,，培養(yǎng)基是否漏出,，是否渾濁，如有請盡快聯(lián)系,。
2,、收到人黑色素瘤細胞UKRV-Mel-15a，如包裝完好,，請在顯微鏡下觀察細胞,。,由于運輸過程中的問題,，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時,，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,，應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下,，再于顯微鏡下觀察,，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁,。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理,。
3、收到人黑色素瘤細胞UKRV-Mel-15a后,，請鏡下觀察細胞,，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,，請離心收集細胞,，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,，使用新鮮配制的培養(yǎng)基,，使用進口胎牛血清。剛接到細胞,，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng),。若細胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％,。
4,、收到人黑色素瘤細胞UKRV-Mel-15a時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度,，如為貼壁細胞,，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時,，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,，吸出培養(yǎng)液,，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清,，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶,。
5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，蓋子微微擰松,。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱,，以備不時之需,。
6、24 小時后,，人黑色素瘤細胞UKRV-Mel-15a態(tài)已恢復并貼滿瓶壁,，即可傳代,。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去,。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘,，不超過 5 分鐘,。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化,。輕輕晃動瓶壁,，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化,。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心,，1000rpm/5min,。棄上清，視細胞數量決定分瓶數,，一般一傳二,，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀,，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁,，直接將溶液吸入離心管離心即可,。
7、貼壁細胞 ,，懸浮細胞,。嚴格無菌操作。換液時,，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,，37℃，5%CO2 培養(yǎng),。
特別提醒： 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,，請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。
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