老牛影视久久久,91人妻av在线

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2
貨號(hào)	BFN608006124	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途	僅供科研

細(xì)胞名稱	人肝細(xì)胞HL-7702[L-02]
貨物編碼	BFN608006124
產(chǎn)品規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1	1.5ml凍存管x2
細(xì)胞數(shù)量	1x10^6	1x10^6
保存溫度	37℃	-198℃
運(yùn)輸方式	常溫保溫運(yùn)輸	干冰運(yùn)輸
安全等級(jí)	1
用途限制	僅供科研用途 1類

培養(yǎng)體系	DMEM高糖培養(yǎng)基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone）
培養(yǎng)溫度	37℃	二氧化碳濃度	5%
簡(jiǎn)介	人肝細(xì)胞HL-7702[L-02] 取自女性，亞洲人,。有報(bào)道顯示,，該細(xì)胞源頭被HeLa所污染，細(xì)胞準(zhǔn)確性*下降,，請(qǐng)各位學(xué)者注意,。建議采用本庫(kù)中HHL-5人正常肝細(xì)胞作為替換,。
注釋	Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=26116706). Originally thought to originate from a normal fetal liver. Transformant: NCBI_TaxID; 333761; Human papillomavirus type 18 (HPV18). Omics: Proteome analysis. Omics: SNP array analysis. Omics: Transcriptome analysis.
STR信息	Amelogenin X CSF1PO 10 D3S1358 15,18 D5S818 11,12 D7S820 12 D8S1179 12 D13S317 13.3 D16S539 9,10 D18S51 16 D21S11 27,28 FGA 18,21 Penta D 8,15 Penta E 7,17 TH01 7 TPOX 12 vWA 16,18
參考文獻(xiàn)	PubMed=23498809; DOI=10.1016/j.transproceed.2012.09.121 Hu X., Yang T., Li C., Zhang L., Li M., Huang W., Zhou P. Human fetal hepatocyte line, L-02, exhibits good liver function in vitro and in an acute liver failure model. Transplant. Proc. 45:695-700(2013) PubMed=23505090; DOI=10.1002/hep.26402 Wang K., Lim H.Y., Shi S., Lee J., Deng S., Xie T., Zhu Z., Wang Y., Pocalyko D., Yang W.J., Rejto P.A., Mao M., Park C.-K., Xu J. Genomic landscape of copy number aberrations enables the identification of oncogenic drivers in hepatocellular carcinoma. Hepatology 58:706-717(2013) PubMed=26116706; DOI=10.1096.14-266718 Ye F., Chen C.-G., Qin J., Liu J., Zheng C.-Y. Genetic profiling reveals an alarming rate of cross-contamination among human cell lines used in China. FASEB J. 29:4268-4272(2015) PubMed=26143199; DOI=10.1016/j.jhazmat.2015.06.031 Cui R., Zhang H.-X., Guo X.-J., Cui Q.-Q., Wang J.-S., Dai J.-Y. Proteomic analysis of cell proliferation in a human hepatic cell line (HL-7702) induced by perfluorooctane sulfonate using iTRAQ. J. Hazard. Mater. 299:361-370(2015)

驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng)

1、收到人肝細(xì)胞HL-7702[L-02]細(xì)胞,，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂,，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁,，如有請(qǐng)盡快聯(lián)系,。

2、收到人肝細(xì)胞HL-7702[L-02]細(xì)胞,，如包裝完好,，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),，請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,，再于顯微鏡下觀察,，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。

3,、收到人肝細(xì)胞HL-7702[L-02]細(xì)胞后,，請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞,。若懸浮的細(xì)胞較多,，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中,。棄掉原液,，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清,。剛接到細(xì)胞,，若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到 80%左右 ,，血清濃度還是在 10％。

4,、收到人肝細(xì)胞HL-7702[L-02]細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況 ,，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí),，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過(guò) 80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng),。如為懸浮細(xì)胞,，吸出培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘,，吸出上清,，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

5,、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里,，存放于 4℃冰箱,，以備不時(shí)之需。

6,、24 小時(shí)后,，人肝細(xì)胞HL-7702[L-02]細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代,。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,，加 3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),，一般 1-3 分鐘，不超過(guò) 5 分鐘,?？梢苑?/span>入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,，見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái),，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,，使之*脫落,，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min,。棄上清,，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二,，如細(xì)胞量多可一傳三,，有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀,，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn),。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁,，直接將溶液吸入離心管離心即可。