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| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 |
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| 貨號 | BFN608006383 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研 |
細胞名稱 | 人肝癌細胞HepG2.2.15 |
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貨物編碼 | BFN608006383 | ||
產品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研 1類 | ||
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人肝癌細胞HepG2.2.15細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織,。該細胞表達甲胎蛋白,、白蛋白、α-2-巨球蛋白,、α-1-抗胰蛋白酶,、轉鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶,、結合珠蛋白,、銅藍蛋白、纖溶酶原,、補體C4,、C3激活物、纖維蛋白原,、α-1酸性糖蛋白,、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白,、視黃醇結合蛋白,；表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體；該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性,。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組,。 | ||
注釋 | Characteristics: Contains 2 head to tails stably integrated HBV of the D-genotype. | ||
STR信息 | Amelogenin：X，Y,；CSF1PO：10,，11；D13S317：9,，13,；D16S539：12，13,；D18S51：13,，14；D19S433：15.2,；D21S11：29,，31,；D2S1338：19，20,；D3S1358：15,，16；D5S818：11,，12；D7S820：10,；D8S1179：15,，16；FGA：22,，25,；TH01：9；TPOX：8,，9,；vWA：17； | ||
參考文獻 | PubMed=3029758; DOI=10.1073/pnas.84.4.1005 Sells M.A., Chen M.L., Acs G. Production of hepatitis B virus particles in Hep G2 cells transfected with cloned hepatitis B virus DNA. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 84:1005-1009(1987) PubMed=21448419; DOI=10.3748/wjg.v17.i9.1152 Zhao R., Wang T.-Z., Kong D., Zhang L., Meng H.-X., Jiang Y., Wu Y.-Q., Yu Z.-X., Jin X.-M. Hepatoma cell line HepG2.2.15 demonstrates distinct biological features compared with parental HepG2. World J. Gastroenterol. 17:1152-1159(2011) PubMed=29481805; DOI=10.1016/j.bbrc.2018.02.175 Ogura N., Ogawa K., Watashi K., Ito T., Wakita T. Novel stable HBV producing cell line systems for expression and screening antiviral inhibitor of hepatitis B virus in human hepatoma cell line. Biochem. Biophys. Res. Commun. 498:64-71(2018)
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驗收細胞注意事項
1,、收到人肝癌細胞HepG2.2.15細胞,，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出,，是否渾濁,，如有請盡快聯系。
2,、收到人肝癌細胞HepG2.2.15細胞,，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞,。,由于運輸過程中的問題,，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,，出現此狀態(tài)時,，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右,，讓細胞先穩(wěn)定下,，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁,。如細胞仍不能貼壁,，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理,。
3,、收到人肝癌細胞HepG2.2.15細胞后,，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞,。若懸浮的細胞較多,，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中,。棄掉原液,，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清,。剛接到細胞,，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細胞迏到 80%左右 ,，血清濃度還是在 10％,。
4、收到人肝癌細胞HepG2.2.15細胞時如無異常情況 ,，請在顯微鏡下觀察細胞密度,，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時,，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng),。如為懸浮細胞,，吸出培養(yǎng)液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘,，吸出上清,，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
5,、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,，存放于 4℃冰箱,，以備不時之需。
6,、24 小時后,，人肝癌細胞HepG2.2.15細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代,。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準,，一般 1-3 分鐘,，不超過 5 分鐘?？梢苑?/span>入37℃培養(yǎng)箱消化,。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來,，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化,。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落,，然后將溶液吸入離心管內離心,，1000rpm/5min。棄上清,，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二,，如細胞量多可一傳三,，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,，以具體細胞和經驗為準,。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可,。
7,、貼壁細胞 ，懸浮細胞,。嚴格無菌操作,。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,，37℃,，5%CO2 培養(yǎng)。
特別提醒： 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,，請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng),。
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