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供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2
貨號	BFN60800633	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途	僅供科研

細胞名稱	人鼻咽癌細胞CNE2
貨物編碼	BFN60800633
產(chǎn)品規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1	1.5ml凍存管x2
細胞數(shù)量	1x10^6	1x10^6
保存溫度	37℃	-198℃
運輸方式	常溫保溫運輸	干冰運輸
安全等級	1
用途限制	僅供科研用途 3類

培養(yǎng)體系	DMEM高糖培養(yǎng)基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone）
培養(yǎng)溫度	37℃	二氧化碳濃度	5%
簡介	人鼻咽癌細胞CNE2 于1983年由谷淑燕,、孔繁裔等建系；源自人鼻咽低分化鱗癌組織,；原代細胞胰蛋白酶消化,，48小時開始生長，傳代20天,。裸鼠體內(nèi)移植100%成瘤,。
注釋	Problematic cell line: Contaminated. On the basis of the STR profile (PubMed=18196576) it is identical to CNE-1 and seems to be a hybrid of Hela and of cell line of unknow origin. Originally thought to originate from a nasopharyngeal carcinoma from a male patient. Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00474. Omics: Deep RNAseq analysis.
STR信息	Amelogenin：X；CSF1PO：10,，11,；D13S317：10，12,，13.3,；D16S539：9，10,，11,；D18S51：13；D19S433：13,；D21S11：27,，30；D2S1338：17,，23,；D3S1358：15,，18；D5S818：11,，12,；D7S820：10，12,；D8S1179：12,，17；FGA：18,，21,；TH01：7，9,；TPOX：8,，12；vWA：14,，16；
參考文獻	CLPUB00143 Zhang S.-H., Gao X.-C., Zeng Y. Cytogenetic studies on an epithelial cell line derived from poorly differentiated nasopharyngeal carcinoma. Yi Chuan Xue Bao 10:498-503(1983) PubMed=6852976; DOI=10.1002/ijc.2910310509 Zhang S.-H., Gao X.-K., Zeng Y. Cytogenetic studies on an epithelial cell line derived from poorly differentiated nasopharyngeal carcinoma. Int. J. Cancer 31:587-590(1983) PubMed=18196576; DOI=10.1002/ijc.23374 Chan S.Y.-Y., Choy K.-W., Tsao S.-W., Tao Q., Tang T., Chung G.T.-Y., Lo K.-W. Authentication of nasopharyngeal carcinoma tumor lines. Int. J. Cancer 122:2169-2171(2008) PubMed=24991015; DOI=10.1128/JVI.01457-14 Strong M.J., Baddoo M., Nanbo A., Xu M., Puetter A., Lin Z. Comprehensive RNA-seq analysis reveals contamination of multiple nasopharyngeal carcinoma cell lines with HeLa cell genomes. J. Virol. 88:10696-10704(2014) CLPUB00484 Xu Z.-H., Sun W.-W., Hang J.-B., Gao B.-L., Hu J.-A. RNA-seq identified a novel functional MET fusion in head and neck cancer 5-8F cell line. Int. J. Clin. Exp. Pathol. 9:8308-8317(2016)

驗收細胞注意事項

1,、收到人鼻咽癌細胞CNE2細胞,，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出,，是否渾濁,，如有請盡快聯(lián)系。

2,、收到人鼻咽癌細胞CNE2細胞,，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞,。,由于運輸過程中的問題,，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,，出現(xiàn)此狀態(tài)時,，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右,，讓細胞先穩(wěn)定下,，再于顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁,。如細胞仍不能貼壁,，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理,。

3,、收到人鼻咽癌細胞CNE2細胞后,，請鏡下觀察細胞，用恰當(dāng)方式處理細胞,。若懸浮的細胞較多,，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中,。棄掉原液,，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清,。剛接到細胞,，若細胞不多時血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細胞迏到 80%左右 ,，血清濃度還是在 10％,。

4、收到人鼻咽癌細胞CNE2細胞時如無異常情況 ,，請在顯微鏡下觀察細胞密度,，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時,，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng),。如為懸浮細胞,，吸出培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘,，吸出上清,，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。

5,、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,，存放于 4℃冰箱,，以備不時之需。

6,、24 小時后,，人鼻咽癌細胞CNE2細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代,。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準(zhǔn)）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,，消化時間以具體細胞為準(zhǔn),，一般 1-3 分鐘,，不超過 5 分鐘?？梢苑?/span>入37℃培養(yǎng)箱消化,。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來,，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化,。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落,，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,，1000rpm/5min。棄上清,，視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),，一般一傳二，如細胞量多可一傳三,，有些細胞不易傳得過稀,，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經(jīng)驗為準(zhǔn),。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁,，直接將溶液吸入離心管離心即可。

7,、貼壁細胞，懸浮細胞,。嚴(yán)格無菌操作,。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,，37℃,，5%CO2 培養(yǎng)。

特別提醒： 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,，請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng),。

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