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青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司
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GT115化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

參  考  價:340 - 1440
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

10x100ul 340元 9999 件 可售

50x100ul 1440元 9999 件 可售

更新時間:2022-01-18 17:54:16瀏覽次數(shù):774次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10x100ul/50x100ul
貨號 BFNC86026 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅用于科研
GT115化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
GT115菌株,,是專門用來克隆含有發(fā)夾結(jié)構(gòu)(Hairpin)或重復(fù)序列等DNA二級結(jié)構(gòu)的基因序列的大腸桿菌菌株,。大腸桿菌中存在一種SbcCD蛋白復(fù)合體,可以識別DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu),,并將其切除,;將sbcC和sbcD兩個基因突變,增強了發(fā)夾結(jié)構(gòu)DNA的穩(wěn)定性,。

GT115化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞


產(chǎn)品規(guī)格CAT#: BFNC86026-01(10×100ul)/BFNC86026-02(50×100ul)


GT115:                                                      100μl/支

pUC19 (control vector,,10pg/μl):                   10μl

保存條件(保質(zhì)期):                            -80℃(6個月)


基因型

F- mcrA?(mrr-hsdRMS-mcrBC) f80lacZDM15?lacX74 recA1 rpsL (StrR) endA1 ?dcm uidA(DMluI)::pir-116?sbcC-sbcD


產(chǎn)品說明

GT115菌株,是專門用來克隆含有發(fā)夾結(jié)構(gòu)(Hairpin)或重復(fù)序列等DNA二級結(jié)構(gòu)的基因序列的大腸桿菌菌株,。大腸桿菌中存在一種SbcCD蛋白復(fù)合體,,可以識別DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu),并將其切除,;將sbcCsbcD兩個基因突變,,增強了發(fā)夾結(jié)構(gòu)DNA的穩(wěn)定性。同時在大腸桿菌基因組中引入uidA(DMluI)::pir-116,,使GT115可以表達 兀 蛋白,,含有R6Kg ori復(fù)制子的質(zhì)粒( pCpG-mcs,、pCpG-LacZ、pCpG-siRNA …)可以正常復(fù)制,。該菌株還含有具有核酸酶 (endA)突變,、重組酶 (recA)突變,增強了外源DNA的穩(wěn)定性,。

青旗生物生產(chǎn)的GT115感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,,pUC19檢測轉(zhuǎn)化效率>2×108 cfu/μg DNA。


GT115化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞


操作方法



1. GT115感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,,迅速插入冰中,,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手bo打EP管底混勻(避免用槍吸打),,冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,,迅速放回冰中并靜置2分鐘,,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,,可提高轉(zhuǎn)化效率),。

4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘,。

5. 5000 rpm離心1分鐘收菌,,留取100 μl左右上清吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。

6. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng),。



注意事項


1. 感受態(tài)細(xì)胞適宜在冰中緩慢融化,。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率,。混入目的DNA時應(yīng)輕柔操作,。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。

2. 此菌株具有鏈霉素抗性,,擁有這種抗性的質(zhì)粒無法使用,。


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