Turbo化學(xué)感受態(tài)細胞

產(chǎn)品規(guī)格CAT#: BFNC86023-01(10×100ul)/BFNC86023-02(50×100ul)

Turbo：                                                     100μl/支

pUC19 (control vector,，10pg/μl):                   10μl

保存條件(保質(zhì)期)：                            -80℃（6個月）

基因型

F' proA⁺B⁺ lacI^qΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) Tet^S endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5

產(chǎn)品說明

Turbo菌株是生長很快的大腸桿菌菌株,。平板上6.5小時可見克隆，營養(yǎng)液中搖菌4-6小時可提取質(zhì)粒,，缺失核酸內(nèi)切酶 (endA),，提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量；Turbo菌株可嚴(yán)格控制lacl^q的表達,，可以克隆毒性基因,；fhuA2突變賦予Turbo菌株對噬菌體T1的抗性；lacZΔM15的存在使Turbo可用于藍,、白斑篩選,。

青旗生物的Turbo感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>5×10⁸ cfu/μg DNA,。

操作方法

1. Turbo感受態(tài)細胞從-80℃拿出,，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化,，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）

并用手bo打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘,。

2. 42℃水浴熱激45秒,，迅速放回冰上并靜置2分鐘,，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (SOC或LB),，混勻后37℃,，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的SOC或

LB培養(yǎng)基上,。

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)6.5小時以上。

Turbo化學(xué)感受態(tài)細胞

注意事項

1. 感受態(tài)細胞適宜在冰中緩慢融化,。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率,。

2. 混入目的DNA時應(yīng)輕柔操作,。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量,。