用于做ELISA檢測的樣本應(yīng)首先離心除去沉淀物或懸浮物質(zhì)保證樣本澄清透明,。為確保實驗的準確性和可靠性,，保證樣品不被降解,，建議-20℃或-80℃保存的樣本在1-6個月內(nèi)完成檢測，4℃保存的樣本在一周內(nèi)完成檢測,。

一,、   液體樣本：

1.    血清：PP管（不含熱原和內(nèi)毒素）收集全血，室溫自然凝固20-30分鐘,，或4℃過夜,，分離出血清，（適當傾斜離心管以擴大液面的橫截面,，使血清能更大程度分離出來）,。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分離心20-30分鐘，將血清和紅細胞迅速小心地分離,，收集上清,，立即進行測定。如暫不檢測可將收集的血清分裝保存于-20℃或-80℃,，避免反復(fù)凍融,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心,。血清樣本應(yīng)注意避免溶血和細菌污染,。

2.    血漿：使用抗凝管或加入抗凝劑（EDTA、檸檬酸鈉或肝素）的PP管收集全血,，混合10-20分鐘,，4℃ 2000轉(zhuǎn)/分，離心20-30分鐘,，收集上清,，立即進行測定，如暫不檢測可將收集的血清分裝保存于-20℃或-80℃,，避免反復(fù)凍融,。樣本應(yīng)避免溶血或高血脂。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)該再次離心,。

3.    尿液、胸腹水,、腦脊液,、母乳、唾液：用無菌管收集樣本,，4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,，離心20-30分鐘。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。

4.    細胞培養(yǎng)上清：

1)        胞外：無菌管收集,，4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,，離心20-30分鐘,，除去細胞碎片和雜質(zhì)，收集上清液備用,，樣本保存在-20℃或-80℃,，避免反復(fù)凍融，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。

2)        胞內(nèi)：加入裂解液，或用pH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,，使細胞濃度達到100萬/ml左右,，通過反復(fù)凍融（如果反復(fù)凍融，破碎效果不好,，可采用超聲波破碎）,，使細胞膜破壞并釋放出細胞內(nèi)成分，2000轉(zhuǎn)/分,，離心20-30分鐘,，收集上清。 

二,、   固體樣本：

1.    組織標本：標本采集后用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。使用時切割標本，稱取1g左右組織,，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,，離心20分鐘,，仔細收集上清。分裝一份待檢測,，其余冷凍備用,，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。

2.    植物標本：取0.1g新鮮植物組織樣本,，液氮中充分研磨；加入樣品體積9倍的提取液（pH7.2-7.4左右的PBS）,，4℃ 8000轉(zhuǎn)/分離心30分鐘,，取上清并暫時保存于4℃待用。如需精確提取,，可在液氮研磨后加入1ml的提取液（80%甲醇）, -20℃過夜后再4℃ 8000轉(zhuǎn)/分,，離心1小時，取上清；上清液過C-18固相萃取柱,，過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干,，保存?zhèn)溆茫簧蠘忧凹尤?span lang="EN-US" style="box-sizing: border-box; font-family: "Segoe UI", "Microsoft Yahei" !important;">pH7.2-7.4左右的PBS緩沖液（1ml定容）,?；靹蚝笫覝胤胖?span lang="EN-US" style="box-sizing: border-box; font-family: "Segoe UI", "Microsoft Yahei" !important;">30分鐘，4℃8000轉(zhuǎn)/分,，離心15分鐘，取上清并暫時保存于4℃待用,。

3.    土壤：稱取1g土壤,，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，充分混勻,。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,，離心20分鐘，仔細收集上清,。分裝一份待檢測,，其余冷凍備用，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。