問題一、1.在15min內(nèi)*溶出的藥物需要做溶出曲線嗎,？

2.如果參比制劑在0.1mol/l鹽酸中很容易分解，還需要對酸性介質(zhì)進行研究嘛？做溶出介質(zhì)的目的主要是選擇很佳的溶出介質(zhì)還是模擬體內(nèi)，考察樣品的溶解情況,？
3.溶出度研究，做6粒行不行,？

謝老師：

(1)需要,。但僅做5、10,、15和30分鐘即可,，因15分鐘和30分鐘已至平臺區(qū),。(2)在測定原料藥在各溶出介質(zhì)中的溶解度和穩(wěn)定性時,，如發(fā)現(xiàn)在某一介質(zhì)中不穩(wěn)定，可依據(jù)不穩(wěn)定性程度（即降解速率）,，酌情考慮測定辦法,，（3）立即進樣；使主成分全部轉(zhuǎn)變成該“物質(zhì)”后測定含量,，再推導出主成分溶出量（需知兩者的轉(zhuǎn)換系數(shù)）,；通過HPLC法將兩者分離，分別測定,。將“轉(zhuǎn)變物”換算成主成分,，后仍以主成分計算出溶出量。(4)測定溶出曲線有很多作用和目的,，不僅是為了建立體內(nèi)外相關性,，更為重要的是采用這樣一種手段來“剖析”和“肢解”固體制劑內(nèi)在品質(zhì)！(5)眾多法規(guī)上均要求做12粒,，是從統(tǒng)計學角度出發(fā),，當生產(chǎn)規(guī)模達幾十萬片、甚至幾百萬片時的考慮,。而就目前國內(nèi)實際生產(chǎn)情況,，無論是在研發(fā)階段和質(zhì)量評估階段皆可采用6片，其測定數(shù)據(jù)已基本被認為具有代表性了,。  

問題二,、復方制劑，其中一個API為酸性（pKa4.5-6.0）,，另一個API的pKa6.5-8.5,，是分別制粒后壓制成片劑,，請問它們應該做哪些溶出介質(zhì)呢？

 謝老師：

(1)首先分別進行兩物質(zhì)在不同溶出介質(zhì)的溶解度測定,，觀測pH值-溶解度曲線圖在縱坐標4.5~8.0間的情況（是否較為“陡峭”）,。
(2)如平坦、采用通常的四種介質(zhì)進行研究皆可,；如陡峭,，建議增加“在4.5~8.0間，每隔0.5間隔”的多溶出介質(zhì)研究,，然后根據(jù)實際測定情況,，擬定質(zhì)量標準中的溶出介質(zhì)。

問題三,、有個問題請教,，看到你寫的“溶出曲線的測定與比較”中關于計算時間點的確定，說調(diào)釋制劑溶出率80%以上的時間點應不多于一個,，調(diào)釋制劑選擇溶出率相近的4-6個時間點計算,。也就是說調(diào)釋制劑的相關系數(shù)f2只有這4-6個時間點就可以，沒有必要取10個或8個時間點,，我這樣理解對嗎,？

 謝老師：

計算f2因子時，n值的貢獻比較大,，會出現(xiàn)n值較大,，計算結(jié)果錯誤地偏高。故日本溶出度試驗指導原則中明確規(guī)定n值不得大于6,。建議嘗試一下,，觀測結(jié)果跟n值的關系如何。

問題四,、我在做一個水溶性差的藥物的片劑,，藥典上規(guī)定的溶出條件是：漿法，50轉(zhuǎn),，0.1mol/LHCl,；現(xiàn)在我想做一個原料藥的溶出情況的對照，我采用的是上述條件,，然后將適量原料藥直接放入介質(zhì)中,，在不同時間點取樣來繪制溶出曲線。請問通過這樣的試驗能說明原料藥在介質(zhì)中的溶出情況嗎,？能跟我們做出來的片劑做對照嗎,？如果不行，應怎樣設計試驗,？

 謝老師：

采用原料藥做出來的溶出曲線是不能夠與成品制劑進行對比研究的,。其測定通常有以下兩種用途：
(1)評價原料藥自身特性對溶出度的影響,，如粒徑、晶型,、顆粒形狀,、比表面能等參數(shù)。
(2)評價不同制劑工藝/處方/輔料制成的中間體對于原料藥溶出的改善程度,。通過對以上各參數(shù)進行優(yōu)化與篩選來為制劑研發(fā)奠定基礎,。

 問題五、非那雄胺片的溶出度實驗中分別對微孔濾膜0.45um,、0.8um規(guī)格做了回收實驗,，在棄去初濾液10ml后，發(fā)現(xiàn)其回收率都低于98%,。不符合要求,，但是當增加初濾液的體積到25ml時，回收率可以達到98%,，但依然存在有一片或者兩片低于此值,。當實驗進行到這里的時候，我有點不知所措了,！是繼續(xù)對不同品規(guī)的濾膜做回收,，還是改方法取離心沉淀的上清液作樣品液呢？

 謝老師：

很高興看到您的提問,。關于這一問題的原理我本人撰寫的“第.11—— 溶出度測定中應注意的若干問題”一文中“2.2 過濾時的損失”有詳細論述。此類小規(guī)格制劑,、由于主成分經(jīng)微粉化處理后與濾膜間有一個吸附飽和過程,，而該過程又會因不同品牌的濾膜有所差異，故即便驗證了不同品牌的濾膜和初濾液棄去的體積數(shù),，也不敢保證實際測定時會遇到的各種復雜情況,。因此建議采用“離心法處理”。對于該種處理的異議主要是“離心會導致取出液中的樣品繼續(xù)溶出的顧慮”,，其實此概率存在的可能性是極其微小的,，即便存在亦不會給實際測定結(jié)果帶來顯著性影響。如欲驗證,，可采用不同轉(zhuǎn)速和離心時間予以明辨,，觀測其是否有不斷增加趨勢。介于以上考慮,，故質(zhì)量標準中擬定離心法的品種我在藥檢所看到過很多,，故請放心采用！其實有更為“藝高人膽大”的作法：取出后靜置一段時間直接進樣（省略了離心繁瑣步驟）,！因為如此小規(guī)格制劑,，取出后樣品中存在的輔料顆粒堵塞色譜柱的概率亦是極其微小的,。我本人自行試驗和在日本學習期間，皆曾如此操作過,，幾百針過后皆平安無事,，不信一試！

問題六,、我近在做緩釋片的質(zhì)量標準,。對于方法學驗證中的“范圍”這一項有點疑惑。我對范圍驗證都是做的限度濃度點的回收率試驗,，這樣做有時就和“準確度”驗證有部分重合,，不知這樣做是否正確？還有一點,，對于釋放度的方法學驗證中“范圍”這一項的驗證,，方法驗證技術指導原則中說“對于釋放度，如規(guī)定限度范圍為,，從1小時后為20％至24小時后為90％,，則驗證范圍應為0～110％。” 對于下限0％,，該采用什么方法進行驗證,？我擬采用的方法（1）采用空白片，充分溶解于釋放介質(zhì),，測定釋放度（理論應為0％）,，測定六個空白片樣品，報告數(shù)據(jù)及RSD,?；蛘撸?）棄去0％這一點，驗證釋放度10％,、60％,、110％三個點，每個點做三個不同濃度的式樣,，各測定3次,，即測定9次，報告已知加入量的回收率（%),。不知這樣考慮是否正確,，還是應該采用其他方法。

謝老師：

其中所涉及的均為溶出度測定法的“方法學驗證內(nèi)容”,。我們有時往往把問題復雜化,，其實如下簡便操作即可：
(1) 線性試驗：在溶出量為10%~120%間設計5個點（如10%、20%,、40%,、80%和120%）,，驗證相關系數(shù)大于0.999即可；當然溶出曲線研究時,，小溶出量大于10%,。
(2) 精密度試驗：將溶出量分別為10%、40%和100%三個濃度溶液,，各測定5~6次,，計算RSD，皆小于2.0%即可,；
(3) 準確度試驗/回收率試驗：取對照品配制成10%,、20%、40%,、80%和120%五個濃度溶液,，其中皆分別加入溶出量為100%時對應的輔料量，測定回收率,，平均回收率在98.0%~102.0%即可,。
(4)《方法驗證技術指導原則》中所述“對于釋放度，如規(guī)定限度范圍為,，從1小時后為20％至24小時后為90％,，則驗證范圍應為0～110％”，太過于理論化與書本化了,，勿“生搬硬套”,！

問題七、我們現(xiàn)在研制的一個片劑,，主藥不溶于水,，也不溶于0.1mol/L的鹽酸溶液。在這兩種介質(zhì)中溶出度很低,，45分鐘達不到30％。而且在水和鹽酸溶液中加入表面活性劑后,，溶出度還是很低,，那么這種情況下，在水和鹽酸兩種溶出介質(zhì)中,，怎么樣來進行研制產(chǎn)品和原研品種的溶出度比較呢,？

謝老師：

建議您詳細閱讀一下本人撰寫的“第.5—— 溶出曲線的測定與比較”一文，測定時間：在酸性介質(zhì)中2小時,、在其他所有介質(zhì)中6小時,。放寬試驗參數(shù)步驟：首先增加轉(zhuǎn)速至75轉(zhuǎn)/槳板法或120轉(zhuǎn)/轉(zhuǎn)籃法，再增加表面活性劑濃度直至3.0%,，如仍未果,，再增加轉(zhuǎn)速至100轉(zhuǎn)（皆采用槳板法,，不再采用轉(zhuǎn)籃法）。評價標準不是以45分鐘達70%計,，而是以連續(xù)兩點溶出率均達90%以上,、且差值在5%以內(nèi)時，試驗則可提前結(jié)束,。如果質(zhì)量標準中擬定取樣時間點為60分鐘或90分鐘,，甚至120分鐘（日本就有很多品種如此擬定），這實則是要求更高,！而我國質(zhì)量標準絕大部分皆擬定為30分鐘或45分鐘,，這是“要求太低的表現(xiàn)”！還望您深入理解為盼,！ 

問題八,、我們做的一個片劑，素片做崩解時限16分鐘,，按藥典要求,，不合格。但是按標準檢查溶出度,，30分鐘取樣溶出95%左右,。按照藥典規(guī)定，做了溶出度檢查的樣品不再進行崩解時限的檢查,，是不是可以判定本品合格,。 

謝老師：

的確有這樣品種：按照質(zhì)量標準中的溶出度試驗合格，而崩解時限不合格,。其實,、這個現(xiàn)象是很正常的，只要搞清楚質(zhì)量標準中何時應擬定崩解時限,、何時應擬定溶出度檢查后（請參照本貼中之前的回復以及所上傳的文章內(nèi)容）即可迎刃而解了……本品*可判定為“合格”,！

問題九、關于溶出延遲現(xiàn)象解釋,，我有點疑問：

（1）為什么要對有這種現(xiàn)象的片子進行校正后才能比較呢,？不校正就不可以比較嗎？

謝老師：

經(jīng)查《日本仿制藥生物等效性試驗指導原則——疑難解答》中如此表述：當參比制劑有溶出延遲滯后現(xiàn)象時,，不一定必須對溶出曲線采用延遲時間校正后再行比較,，直接比較亦是可以的。但前提是仿制制劑與參比制劑的延遲滯后時間差必須在10分鐘以內(nèi),。
【注】由于日本仿制藥眾多,、故日本厚生省藥品管理局陸續(xù)出臺了  《仿制藥生物等效性試驗指導原則（主要針對固體制劑、其中有詳盡的溶出度研究方法）》、  《含量規(guī)格不同的口服固體制劑生物等效性試驗指導原則》,、  《口服固體制劑處方變更（含其他變更）后生物等效性試驗指導原則》,、《固體制劑改變劑型后生物等效性試驗指導原則》，以及這些指導原則的《疑難解答》,。本人于去年上半年翻譯了以上所有內(nèi)容的新版（2007年版）,、并加入了個人注解與詮釋，共六萬五千字,。國家藥監(jiān)局新藥審評中心內(nèi)部刊物《藥品審評論壇》于2008年第3期刊登了其中的  《仿制藥生物等效性試驗指導原則》,。 “采用延遲時間校正溶出曲線的具體實例”屆時請詳見《仿制藥生物等效性試驗指導原則——疑難解答》部分。

（2）在溶出試驗時,，配制難溶性藥物對照品溶解,，先用有機溶劑溶解，然后用其它介質(zhì)定容,，是不是只用目測不混濁等就認為*溶解呢,？

謝老師：

是的。肉眼觀察,，輕微振搖時無任何固體顆粒懸浮,、即可。建議勿采用“有機溶劑溶解,，再用溶出介質(zhì)定容”的方式,。而是采用：有機溶劑溶解并配制成一個高濃度的濃溶液在一容量瓶內(nèi)，隨后精密量取適量分別用多種溶出介質(zhì)稀釋的方式,；同時該濃溶液還可放置在冰箱內(nèi)保存以待其后使用,，如此便可做到“事半功倍”！