圖1. 摻雜不同濃度鋯（Zr）（0,、18,、38、58,、68,、78%）的 ZrNPs 的表征和水降解行為

研究者通過改進的高溫共沉淀法，合成了一系列不同鋯（Zr）摻雜濃度的稀土納米粒子,。這些納米粒子在水相中表現(xiàn)出優(yōu)異的長波發(fā)射,、高量子產(chǎn)率和可調(diào)的生物降解時間。

隨著Zr摻雜濃度的增加,，納米顆粒的形貌由圓形過渡到方形,，尺寸呈現(xiàn)出由大到小的趨勢。實驗結(jié)果顯示,，78% ZrNPs的熒光強度比1,，2-二氯乙烷（DCE）中的IR-26高出61.3倍，表明其具有較高的近紅外熒光量子產(chǎn)率,。此外,，通過將 Ho3+和 Tm3+代替Er3+作為鋯基基質(zhì)中的激活劑，進一步優(yōu)化了納米顆粒的近紅外發(fā)射性能,。動態(tài)光散射（DLS）分析顯示,，不同Zr摻雜濃度的納米顆粒具有不同的水合粒徑。值得注意的是,，當(dāng)Zr含量超過58%時,，納米顆粒開始顯示出降解性。其中,，78% ZrNPs的降解性能顯著,，在168 h內(nèi)降至初始亮度值的10%以下,。

圖2. 68%和78% ZrNPs的體內(nèi)神經(jīng)成像

研究者將68%和78% Zr摻雜的ZrNPs應(yīng)用于神經(jīng)節(jié)內(nèi)神經(jīng)注射，并觀察到所需的NIR-II熒光強度,。結(jié)果顯示,，78% ZrNPs的熒光強度在24小時內(nèi)下降至0，而68% ZrNPs的熒光強度仍可檢測到,。此外,，研究者還研究了直接給予劑量對68%或78% ZrNPs降解率的影響。結(jié)果表明,，相同劑量的ZrNPs中,，Zr摻雜濃度越高，熒光強度下降越快,，降解速度更快,。

根據(jù)實驗結(jié)果，當(dāng)Zr摻雜濃度較高時,，合成體系主要產(chǎn)生可降解的Zr基納米顆粒而不是不可降解的Y基納米顆粒,，導(dǎo)致降解速度更快。同時,，低給藥劑量下ZrNPs表面與水的接觸更多,，導(dǎo)致更容易降解?？紤]到足夠的熒光強度和適當(dāng)?shù)慕到鈺r間窗,，用于后續(xù)神經(jīng)成像的78% ZrNPs濃度被確定為300mg/mL。

圖3. 78%的ZrNPs,、YNPs和ICG的神經(jīng)成像

這項研究通過直接給予小鼠坐骨神經(jīng)78% ZrNPs,、YNPs或ICG，比較了不同時間點的NIR-II熒光成像,。結(jié)果顯示，78% ZrNPs的熒光歸一化強度隨著時間的延長而降低,，并在8小時后達到初始值的0.02,，表明78% ZrNPs幾乎降解并實現(xiàn)了成像時間窗。同時,，研究證明了78% ZrNPs在大鼠坐骨神經(jīng)中的降解能力,。與ICG（FDA批準(zhǔn)用于臨床的近紅外染料）相比，78% ZrNPs表現(xiàn)出更高的成像質(zhì)量和光穩(wěn)定性,。在78% ZrNPs給藥24小時后,，解剖的離體小鼠坐骨神經(jīng)未顯示出NIR-II相機檢測到的熒光，而YNPs和ICG在24小時后仍在神經(jīng)中顯示出顯著的熒光強度,。此外,，通過蘇木精-伊紅（H&E）染色檢查,，觀察到在直接給予ICG或78% ZrNPs 24小時后，坐骨神經(jīng)纖維結(jié)構(gòu)均一,，證明78% ZrNPs具有良好的生物安全性,，對小鼠坐骨神經(jīng)沒有影響。

圖4. 78% ZrNPs 的多重神經(jīng)成像以及神經(jīng)和血管的雙色成像

通過直接給藥并在24小時內(nèi)觀察,，發(fā)現(xiàn)ZrNPs導(dǎo)致神經(jīng)熒光強度逐漸降低且在三次獨立成像之間沒有相互影響,。為了優(yōu)化成像效果并減少背景噪音，科研人員設(shè)計并合成了白蛋白逃逸染料IR-808Ac,，它能避免與白蛋白結(jié)合并加速體外排泄,，從而帶來較低的成像背景信號。IR-808Ac和78% ZrNPs可分別響應(yīng)808nm和980nm激光激發(fā),，具備無熒光干擾的雙通道成像特性,。合并圖像表明，IR-808Ac在24小時內(nèi)代謝,，允許在沒有信號干擾的情況下對血管和神經(jīng)進行連續(xù)三次雙通道熒光成像,。

該研究在物理神經(jīng)損傷的小鼠模型中，利用78% ZrNPs對神經(jīng)恢復(fù)過程進行了短期和長期的監(jiān)測,。針對輕度損傷（10秒鉗夾）,，在第七天取出受損神經(jīng)進行H&E染色，結(jié)果接近正常神經(jīng),，證實輕度損傷可在7天內(nèi)基本恢復(fù)正常,。進一步地，研究者模擬了更嚴(yán)重的損傷（30秒或60秒）并同樣施用ZrNPs進行長期監(jiān)測,。結(jié)果顯示,，嚴(yán)重?fù)p傷組的熒光神經(jīng)長度在7天后開始減小并在第21天達lowest，表明小鼠未能從此類損傷中恢復(fù)且可能存在惡化跡象,。

總結(jié)：通過利用新型可生物降解的納米探針,，該研究可以實現(xiàn)可編程的生物降解時間。這使研究者能夠更好地了解神經(jīng)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能,，為神經(jīng)疾病的早期診斷和治療提供強有力的支持,。該納米探針可以幫助臨床醫(yī)生了解神經(jīng)損傷的具體類型，并計劃適當(dāng)?shù)氖中g(shù)或非手術(shù)干預(yù),，以實現(xiàn)功能恢復(fù),。

參考文獻

X. Zheng, Y. Du, Z. Dang, K. Lan, G. Liu, J. Ren, X. Wang, S. Zhu, Biodegradable Near-Infrared-IIb Rare-Earth Nanoprobe Enables Time-Programmable Neuroimaging. Adv. Funct. Mater. 2024, 2313278

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近紅外二區(qū)小動物活體熒光成像系統(tǒng) - MARS 

NIR-II in vivo imaging system 

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