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平底微孔板檢測(cè)在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用
以平底微孔板的形式開展分子和細(xì)胞分析已然成為當(dāng)下的熱潮,。這不僅能夠大大提高通量,，還能夠減少試劑用量和降低實(shí)驗(yàn)成本,。如今的微孔板檢測(cè)儀提供多種檢測(cè)模式,，包括光吸收,、熒光和發(fā)光檢測(cè)等,，可應(yīng)用在生命科學(xué)研究的各個(gè)方面,。
現(xiàn)在我們就來介紹一下平底微孔板檢測(cè)的幾大類應(yīng)用。
細(xì)胞研究
對(duì)于生命科學(xué)研究而言,，細(xì)胞是*的一部分,。在開展細(xì)胞相關(guān)的實(shí)驗(yàn)時(shí)，人們除了檢測(cè)細(xì)胞增殖外,，還廣泛使用各種熒光染料,、熒光蛋白以及抗體來檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞狀態(tài)以及蛋白靶點(diǎn)的活性。因此,，微孔板檢測(cè)主要應(yīng)用于細(xì)胞活力,、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡的檢測(cè),，以及信號(hào)通路的分析,。
細(xì)胞活力
健康的細(xì)胞才能保證高品質(zhì)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此,，細(xì)胞活力的評(píng)估是許多實(shí)驗(yàn)的環(huán)節(jié),。代謝活性通常被認(rèn)為是細(xì)胞活力的指標(biāo)，這可通過細(xì)胞還原電位來評(píng)估,。此外，評(píng)估細(xì)胞膜完整性也是一種簡(jiǎn)便的方法,。在此過程中,，微孔板檢測(cè)提供了整個(gè)細(xì)胞群的信息，而不是跟蹤單個(gè)細(xì)胞的行為,。
活細(xì)胞固有的還原能力可作為代謝活性的指標(biāo),。在測(cè)定細(xì)胞群體的還原電位時(shí)，信號(hào)與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,。
細(xì)胞膜完整性也是細(xì)胞活力檢測(cè)的通用指標(biāo),。只有在細(xì)胞膜受損時(shí)，DNA結(jié)合染料才能進(jìn)入細(xì)胞,，因此DNA染色可作為細(xì)胞死亡的標(biāo)志,。
細(xì)胞凋亡
細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)顯著特征是Caspase酶的激活，它參與蛋白底物的裂解和隨后的細(xì)胞解體,。微孔板檢測(cè)可以對(duì)活細(xì)胞以及細(xì)胞裂解液或提取物中的活性Caspase進(jìn)行分析,。基于微孔板的caspase分析通常是采用熒光和顯色檢測(cè),。它利用caspase酶的活性和特別設(shè)計(jì)的報(bào)告底物來產(chǎn)生熒光或顯色的信號(hào),，這可通過微孔板檢測(cè)儀來讀取。
細(xì)胞增殖
細(xì)胞增殖分析對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化研究是至關(guān)重要的,，在藥物開發(fā)期間常用于評(píng)估化合物毒性和腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制,。增殖檢測(cè)通常是基于DNA含量或細(xì)胞代謝，或者是定量DNA的合成,。通過微孔板檢測(cè)平臺(tái),，人們可高通量地開展細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性或藥物功效研究,。