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5′-核苷酸檢測(cè)試劑盒（過(guò)碘氧化法）

產(chǎn)品貨號(hào)：BA1547

產(chǎn)品規(guī)格：50T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

核酸(nucleic?acid)是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，是生命的基本物質(zhì)之一,，廣泛存在于所有動(dòng)植物細(xì)胞,、微生物體內(nèi)，根據(jù)化學(xué)組成不同,，核酸可分為脫氧核糖核酸(簡(jiǎn)稱DNA)和核糖核酸(簡(jiǎn)稱RNA),。

5′-核苷酸檢測(cè)試劑盒(過(guò)碘氧化法)檢測(cè)原理是無(wú)機(jī)磷與鉬酸銨形成黃色的磷鉬酸銨，隨后還原劑把高價(jià)鉬離子還原成低價(jià)鉬離子,，進(jìn)而形成藍(lán)色的鉬藍(lán),，在一定濃度范圍藍(lán)色深淺與磷含量成正比，在660nm處檢測(cè)吸光度,，通過(guò)檢查標(biāo)準(zhǔn)曲線,，獲得磷含量,。同時(shí)為了消除其他無(wú)機(jī)磷的干擾，測(cè)定未經(jīng)過(guò)碘酸氧化的無(wú)機(jī)磷,，予以扣除,，即為準(zhǔn)確的5′-核苷酸磷。該試劑盒的特點(diǎn)是專一測(cè)定5′-核苷酸,。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

操作步驟(僅供參考)：

1.        稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)，按磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)：蒸餾水=1：99的比例稀釋標(biāo)準(zhǔn)品至10μg/ml,。取干凈離心管或試管,，按下表進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品濃度的依次稀釋，獲得不同濃度的多個(gè)磷標(biāo)準(zhǔn),。

2.        制備待測(cè)樣液：取用粗AMP水解液或RNA水解液,，作為待測(cè)樣液。

3.        磷測(cè)定：按下表進(jìn)行操作,，依次加入下列溶液,，不能顛倒，每加一種試劑,，必須充分混勻,。如果樣品中有無(wú)機(jī)磷，應(yīng)同時(shí)檢測(cè)無(wú)機(jī)磷,，并將無(wú)機(jī)磷扣除,。

4.        孵育,，以空白管調(diào)零，比色杯光徑1.0cm,，分光光度計(jì)測(cè)定660nm處吸光度(即為A₆₆₀),，分別為A_氧化、A_未氧化,。

計(jì)算:

 以磷含量（μg/ml）為橫坐標(biāo),，吸光度為縱坐標(biāo)作圖,，得標(biāo)準(zhǔn)曲線。氧化管為樣液中所有磷的含量,，未氧化管為樣液未氧化前無(wú)機(jī)磷的含量,，二者只差即為樣液中5′-核苷酸磷含量。

按下列公式計(jì)算樣液中5′-核苷酸的含量：

5′-

核苷酸含量（mg/ml）=（CM/31）×（N/1000）

注意事項(xiàng)：

1.        上述低溫試劑避免反復(fù)凍融,，以免失效或效率下降,。

2.        待測(cè)樣本如不能及時(shí)測(cè)定，應(yīng)置于2~8℃保存,，3天內(nèi)穩(wěn)定,。

3.        如果樣品濃度過(guò)高，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè),，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),。

有效期：6個(gè)月有效。