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Lezol（總RNA提取試劑盒）  核酸類

產(chǎn)品貨號(hào)：T11163

產(chǎn)品規(guī)格：50ml/100ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Lezol(總RNA提取試劑) 核酸類 Lezol是一種尚寶生物自主研發(fā)和生產(chǎn)的用于細(xì)胞或組織的總RNA提取試劑,。Lezol采用不Invitrogen TRIzol相似的原理和方法，Lezol顏色,、抽提的方法和步驟亦不Invitrogen TRIzol*相同,。Lezol含酚和異硫氰酸胍等物質(zhì)，能迅速裂解細(xì)胞或組織并且滅活核酸酶,，保持RNA的完整性,。加入氯仿并離心后，溶液形成上清層為水相(無色),、中間層,、下層為有機(jī)相(紅色)。上清層用異丙醇沉淀回收總RNA,，中間層用乙醇沉淀回收DNA,，下層用異丙醇沉淀回收蛋白。尚寶生物 Lezol適用于從各種組織或細(xì)胞中快速分離總RNA,，既可用于小量樣品(50～100mg組織,、5×10細(xì)胞)，也可用于大量樣品(>1g組織/>10細(xì)胞),。提取的總RNA質(zhì)量高,，可用于Northern blot、Dot blot,、polyA篩選,、體外翻譯、RNase保護(hù)分析和分子克隆,。Lezol具有以下特點(diǎn)：①適用范圍廣,；②操作簡(jiǎn)單,，整個(gè)過程1小時(shí)內(nèi)完成,；③純度高；④污染少,。

產(chǎn)品組成：

自備材料：    

1. 試劑：無水乙醇,、氯仿、異丙醇,、DEPC處理水等,。

2. 耗材： RNase廣泛存在于人的皮膚上和體液及環(huán)境中，RNase是導(dǎo)致RNA降解的最主要物質(zhì),，非常穩(wěn)定,。操作時(shí)應(yīng)佩戴一次性口罩、手套,、帽子,。塑料制品、玻璃和金屬物品,、實(shí)驗(yàn)儀器等應(yīng)清除RNase,，移液器吸頭、EP管等制品的RNase free處理尤為重要,。

3. 儀器：低溫高速離心機(jī),、低溫冰箱。

操作步驟（僅供參考）：    

1. 樣品準(zhǔn)備

(1) 貼壁細(xì)胞：

1 接裂解：直接在培養(yǎng)瓶/皿中加入Lezol裂解細(xì)胞,，每10cm面積加1ml Lezol,，用移液器吹打混勻。

2 胰蛋白酶消化：用無菌PBS洗滌細(xì)胞后,，加入含有0.05～0.25%胰蛋白酶的PBS處理細(xì)胞,，當(dāng)細(xì)胞脫離容器壁后，加入含有血清的培養(yǎng)基終止反應(yīng),，將細(xì)胞溶液轉(zhuǎn)移至無RNase的離心管中,，5000～6000g離心5min，收集細(xì)胞沉淀,，去除上清,。收集細(xì)胞時(shí)一定要將細(xì)胞培養(yǎng)液去除干凈，否則裂解不*,，降低RNA收獲率,。血液：取0.5～1 ml新鮮或凍存的血液，12000g離心5min,，去除血漿,，加入1ml Lezol，充分振蕩混勻,。

2. 核酸分離：充分振蕩混勻(可以置于低溫/超低溫冰箱凍存5～10min后,，充分振蕩，反復(fù)1～3次),，將裂解樣品或勻漿液室溫放置5～10min,，使核蛋白不核酸*分離,。

3. 樣品分層：加入0.2ml氯仿/1ml Lezol，劇烈振蕩15s,，室溫放置2～3min,。置于4℃離心機(jī)，12000g離心10～15min,。上層為水相,，中間層和下層為有機(jī)相，RNA在上層水相,。

4. 沉淀RNA：吸取上層水相(約500μl)轉(zhuǎn)移至無RNase的離心管中(不要吸取任何中間層物質(zhì),否則會(huì)有染色體DNA污染),，加入等體積異丙醇混勻(或者加入1.2倍體積尚寶生物Trizol與用RNA沉淀液，超低溫冰箱放置2～3hr,可以大大提高RNA回收率）,，室溫放置15～20min,。12000g 4℃離心10min，離心后管側(cè)或管底形成膠狀沉淀,，棄上清,。

5. 洗滌RNA：加入1ml DEPC水配制的75%乙醇/1ml Lezol洗滌沉淀(或者加入1ml尚寶生物Trizol與用RNA洗滌液，可以大大提高RNA純度）,，室溫放置5～10min,，7500g 4℃離心5min，棄上清,。室溫干燥5～10min,，不宜過分干燥，否則RNA難以溶解,。

6. 溶解RNA：加入30～50ul RNase-free ddH2O充分溶解RNA,，-70℃長(zhǎng)期保存或直接用于后續(xù)試驗(yàn)。對(duì)于肝,、胰腺,、腎等組織中RNase含量高的樣品，沉淀時(shí)用100%去離子甲酰胺溶解,。

分析與定量：

1. 測(cè)定樣品在260nm和280nm的吸收值確定RNA的質(zhì)量,。按1OD=40pg RNA計(jì)算RNA的產(chǎn)率。OD260/280在1.8～2.0視為抽提RNA純度較好,。濃度在4μg/ml以上的樣品適于用分光光度計(jì)測(cè)定,。

2. 進(jìn)行甲醛變性瓊脂糖電泳，確定RNA的完整性和污染情況,。

3. 核酸分析儀測(cè)定RNA的質(zhì)量和純度,。

注意事項(xiàng)：

1. 樣品保存：加入 Lezol 混勻后，樣品可在-70℃放置 1～2 月,；RNA 樣品可以在 70%酒精中-70℃保存 2～4 周：如果需要長(zhǎng)期保存,，應(yīng)置于超低溫冰箱中保存,。

2. Lezol 是強(qiáng)腐蝕性物質(zhì),，污染皮膚或眼睛后,，立即用清水或生理鹽水沖洗，必要時(shí)尋求醫(yī)生的幫助,。

3. Lezol 可常溫運(yùn)輸,，建議保存 4℃保存。

4. 為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

有效期：

12個(gè)月有效,。

誠(chéng)招全國(guó)地區(qū)代理經(jīng)銷商！??！

尚寶主營(yíng)產(chǎn)品：

試劑盒

· 細(xì)胞活力/毒性檢測(cè)試劑盒

· 蛋白提取相關(guān)試劑盒

· 蛋白定量/濃度測(cè)定試劑盒

· 核酸純化/提取相關(guān)試劑盒

· 核酸檢測(cè)試劑盒

· 染色試劑盒

· 生化試劑盒檢測(cè)試劑盒

染色類

染色液     固定液    脫鈣液     染色輔助試劑     指示劑    

熒光染料

通用Buffer      常規(guī)溶液  

核酸類       蛋白與免疫  

生化試劑    病理常用染色試劑  

細(xì)胞類      細(xì)胞培養(yǎng)基

標(biāo)準(zhǔn)品      ELISA 試劑盒  

DNA Marker   耗材

客服響應(yīng)速度快 上海尚寶的銷售團(tuán)隊(duì)是由生物相關(guān)專業(yè)畢業(yè)的本科生和碩士生組成，業(yè)務(wù)技能熟練,，對(duì)于客戶的咨詢能夠快速響應(yīng),，給出準(zhǔn)確的產(chǎn)品信息，并且能針對(duì)客戶的實(shí)驗(yàn)推薦適合的產(chǎn)品,。使客戶在產(chǎn)品訂購(gòu)過程中沒有顧慮,，為科研工作者提供專業(yè)的服務(wù)。

產(chǎn)品種類齊全

品質(zhì)*穩(wěn)定

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