NaOH/SDS溶液 核酸類(lèi)

產(chǎn)品貨號(hào)：T11027

產(chǎn)品規(guī)格：2×100ml/2×500ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

堿裂解法是常用的小量制備質(zhì)粒DNA的方法,，可用于抽提微克級(jí)別的質(zhì)粒DNA,。葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)、NaOH/SDS溶液和乙酸鉀溶液(5mol/L,pH4.8)是其常用試劑,。NaOH/SDS溶液由NaOH溶液和SDS溶液等組成,，臨用前等量混合使用，溶液呈堿性,，是堿裂解法提DNA的重要成分,。其原理是：當(dāng)菌體在NaOH和SDS溶液中裂解時(shí)，蛋白質(zhì)與DNA發(fā)生變性,，加入中和液（乙酸鉀溶液）后,，質(zhì)粒DNA分子迅速?gòu)?fù)性，呈溶解狀態(tài),，離心時(shí)留在上清中,，由于蛋白質(zhì)和染色體DNA不復(fù)性而呈絮狀，離心時(shí)可沉淀下來(lái),。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,，不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

操作步驟(僅供參考)：

1. 配置 NaOH/SDS 溶液：取 NaOH 溶液和 SDS 溶液等比例混合后使用,，宜臨用前配置,。

2. 接種一個(gè)單菌落于 LB 培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)至飽和狀態(tài),。

3. 取 1.5ml 培養(yǎng)液,，10000～12000g 離心 20～60s，棄上清,。

4. 用 100μl 葡萄糖-Tris-EDTA 溶液*重懸沉淀,，室溫靜置 5min。

5. 加入 200μl 新鮮配置的 NaOH/SDS 溶液,，顛倒混勻數(shù)次,，可在冰上放置 2~5min，使細(xì)胞膜破裂,。

6. 加入 150μl 乙酸鉀溶液,，將管溫和顛倒數(shù)次混勻，見(jiàn)白色絮狀沉淀,，可在冰上放置 3~5min,，此時(shí)，質(zhì)量 DNA復(fù)性,，染色體和蛋白質(zhì)不可逆變性,，形成不可溶復(fù)合物。

7. 加入 150μl 酚氯仿異戊醇,，震蕩混勻,，4℃12000r/min 離心 10min,。繼續(xù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：

1. NaOH 溶液呈強(qiáng)堿性,，請(qǐng)小心操作,，如果皮膚接觸，應(yīng)盡快擦干并用流水充分沖洗,。

2. 為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：12個(gè)月,。

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