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EDTA脫鈣液
  • EDTA脫鈣液

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更新時(shí)間:2024-08-12 21:00:06

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EDTA脫鈣液是一種相對(duì)較好的螯合脫鈣劑,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響最小,可以較好的保存組織的某些酶類(lèi),經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色,。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數(shù)周至數(shù)月,。

EDTA脫鈣液

產(chǎn)品貨號(hào):E1135

產(chǎn)品規(guī)格:100ml/500ml

產(chǎn)品說(shuō)明:

一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化灶時(shí),,含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因?yàn)殁}和石蠟之間的密度不同,,較難切除完整的切片,。對(duì)含鈣組織最好固定之后,再進(jìn)行脫鈣或二者同時(shí)進(jìn)行,。然后進(jìn)行下游的實(shí)驗(yàn),,如脫水、透明,、浸蠟,、包埋、切片,。用于脫鈣的試劑很多,,脫鈣劑包括有機(jī)酸,、無(wú)機(jī)酸,、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。?

EDTA是一種相對(duì)較好的螯合脫鈣劑,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響最小,,可以較好的保存組織的某些酶類(lèi),,經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,,一般脫需要數(shù)周至數(shù)月,。?

EDTA脫鈣液優(yōu)點(diǎn):①經(jīng)EDTA脫鈣的組織染色結(jié)果好;②對(duì)組織的結(jié)構(gòu)損害??;③用化學(xué)方法測(cè)試可以確定脫鈣的終點(diǎn)。?

缺點(diǎn):①脫鈣速度很慢,,不適合常規(guī)標(biāo)本脫鈣使用,;②脫鈣后組織會(huì)稍微變硬。

產(chǎn)品組成

試劑名稱(chēng)

規(guī)格

保存條件

EDTA脫鈣液

100ml/500ml

室溫

主要成分:主要由EDTA,、磷酸鹽等組成,,用NaOH溶液調(diào)pH值為7.2。

自備材料:?

1. PBS,。

2. 蒸餾水,。

3. 加熱裝置或微波爐。

操作步驟(僅供參考):

1. 骨組織脫鈣時(shí),,取材不易過(guò)厚,,一般大約5mm。?

2. 組織固定后,,用PBS清洗3次,,每次20min。

3. 組織用蒸餾水洗清洗3次,,每次20min,。?

4. 組織轉(zhuǎn)移至20~30倍體積的EDTA脫鈣液中,脫鈣10~30天或更長(zhǎng)時(shí)間,。如果想加快脫鈣速度,,可以置于37℃進(jìn)行脫鈣。如果必要,,更換新的EDTA脫鈣液繼續(xù)脫鈣,,多數(shù)組織脫鈣2周~3個(gè)月即可,每周更換一次,,直至終點(diǎn),。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設(shè)在200W左右的檔位,每次加熱5min,,依據(jù)組織厚度和密度重復(fù)3~5min,,中間間隔3~5min,。?

5. 用蒸餾水沖洗數(shù)次。?

6. 常規(guī)脫水,、包埋,。

注意事項(xiàng):

1. 厚度5mm的骨組織塊脫鈣時(shí)間一般脫鈣10~30天即可。?

2. 適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度,,一般不應(yīng)超過(guò)37~40℃,,溫度過(guò)高容易使骨組織造成松散解體,尤其不可大于60℃,。脫鈣應(yīng)*,,防止脫鈣不足或過(guò)度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時(shí)盡量縮短脫鈣時(shí)間,,以免脫鈣過(guò)長(zhǎng)引起組織損害,。?

3. 脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器,。?

4. 骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時(shí)進(jìn)行,,不應(yīng)先脫鈣后固定,以便減少組織的損傷程度,。?

5. 每隔一段時(shí)間檢測(cè)一次脫鈣程度,,避免脫鈣過(guò)度,脫鈣過(guò)度會(huì)增加組織的損傷程度,,影響染色結(jié)果,。?

6. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

有效期 12個(gè)月有效,。



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