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Carazzi 蘇木素染色液
產(chǎn)品貨號:G3210
產(chǎn)品規(guī)格:100ml/500ml
產(chǎn)品簡介:
蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱 HE 染色,,是病理學(xué)和組織學(xué)常用的一種染色方法,。蘇木 精為堿性天然染料,可使細胞核著色,。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是 DNA,,在 DNA 的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷 酸鏈上的磷酸基向外,,使 DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負電荷,,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵 或氫鍵結(jié)合而被染色,。
Leagene Carazzi 蘇木素染色液主要由蘇木素,、硫酸鋁鉀等組成,屬于明礬蘇木素液的一種,,染色液中蘇木精 含量量小,,無氧化膜形成,對細胞核染色很清晰,,不著染胞質(zhì)和纖維成分,,屬進行性染色,故染色后不需鹽酸乙 醇分化,。該染液類似于 Mayer 蘇木素染色液,,可以對糖原進行特染,,對酶組化和免疫組化等染色后復(fù)染細胞核,, 尤其適用于在經(jīng)過特殊染色后不能經(jīng)酸處理時對細胞核的復(fù)染。此時所用時間較短(通常 8~10min),,染完后即可 進行藍化,,不必分化。
染色原理:
1,、 細胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天然染料,,可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是 DNA,,在 DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)中,,兩 條核苷酸鏈上的磷酸基向外,,使 DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負電荷,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以 離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色,。
2,、 細胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著色,。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),,為兩性化合 物,細胞漿的染色與染液的 pH 值密切相關(guān),。當染液的 pH 值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(4.7~5.0)以下時,,胞漿蛋白質(zhì) 以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,,就可被帶負電荷的酸性染料染色,。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞 漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,,使細胞漿著色,,呈現(xiàn)紅色。
3,、 分化作用:
染色后,,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,,所用的溶液稱為分化液,。 在 HE 染色中常用鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),,使組織與色素分離而退色,。經(jīng)蘇木素染 色后,必須用鹽酸乙醇分化,,使細胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,,再進行伊紅染色, 才能保證細胞核與細胞漿染色的分明,。
4,、 返藍作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),,呈紅色,;在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài),呈藍色,。組 織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,,故分化之后,,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性 水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色,,這個過程稱為返藍作用或藍化作用,。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍, 但所需時間較長,。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
---|---|---|
Carazzi 蘇木素染色液 | 100ml/500ml | 4℃,,避光 |
操作步驟:
1. 根據(jù)實驗具體需求和所染組織或者細胞適量染色。
2. 無需鹽酸乙醇分化,,染色時間一般 8~10min,。退行性染色時需 15~30min,進行性染色需 8~15min,,一般控制 在 10min 即可,。
注意事項:
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液,。
2. 鹽酸乙醇分化時間應(yīng)根據(jù)切片厚薄,、組織類別以及新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠,,以便徹 底清洗酸,。
3. 冷凍切片染色時間盡量要短。
4. 藍化液常使用 0.2~1%氨水或 Scott 促藍液或 0.1~1%碳酸鋰溶液,。
5. 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12 個月有效,。
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