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Hoechst 33342 /PI細(xì)胞凋亡染試劑盒

產(chǎn)品貨號：R21807

產(chǎn)品規(guī)格：100T

產(chǎn)品簡介：

  尚寶生物生產(chǎn)的細(xì)胞凋亡熒光 Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒為您提供了一種經(jīng)典而又快速簡便的細(xì) 胞凋亡與細(xì)胞壞死檢測方法,。本試劑盒采用 Hoechst 33342 和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)雙染的方 法,。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),，染色質(zhì)會(huì)固縮。Hoechst33342 可以穿透細(xì)胞膜,，染色后凋亡細(xì)胞熒光會(huì)比正常細(xì)胞 明顯增強(qiáng)。碘化丙啶(PI)不能穿透細(xì)胞膜,，對于具有完整細(xì)胞膜的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞不能染色,。而對于 壞死細(xì)胞，其細(xì)胞膜的完整性喪失，碘化丙啶(PI)可以染色壞死細(xì)胞,。上述兩種染料雙染后,，使用流式細(xì) 胞儀或熒光顯微鏡檢測時(shí)，正常細(xì)胞為弱紅色熒光＋弱藍(lán)色熒光,，凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光＋強(qiáng)藍(lán)色熒光,， 壞死細(xì)胞為強(qiáng)紅色熒光＋強(qiáng)藍(lán)色熒光。參考下圖,，左圖為誘導(dǎo)凋亡前的正常細(xì)胞,，右圖為誘導(dǎo)凋亡后的細(xì) 胞。

染色快速方便,，兩種染料的染色僅需 20-30 分鐘,，一步染色即可完成。使用方便,，使用流式細(xì)胞儀檢測 時(shí),，無需稀釋等配制過程，也無需再準(zhǔn)備其它任何溶液,。本試劑盒足夠檢測 100 個(gè)樣品,，每個(gè)樣品的細(xì)胞 數(shù)量可以為 1×10 5-1×10 6。

產(chǎn)品內(nèi)容：

操作步驟：

1. 每個(gè)樣品收集約 10-100 萬細(xì)胞于 1.5ml 離心管內(nèi),，離心棄上清,。細(xì)胞沉淀用 0.8-1ml 細(xì)胞染色緩沖液 重懸。

2. 加入 5 微升 Hoechst 染色液,。

3. 加入 5 微升 PI 染色液,。

4. 混勻，冰浴或 4℃孵育 20-30 分鐘,。

5. 用流式細(xì)胞儀檢測紅色熒光和藍(lán)色熒光,。

6. 如果使用熒光顯微鏡檢測，檢測前離心沉淀細(xì)胞,，用 PBS 洗滌一次,，再涂片觀察紅色熒光和藍(lán)色熒光。 對于貼壁細(xì)胞使用熒光顯微鏡檢測,，可以不收集細(xì)胞,，直接依次按照上述比例加入細(xì)胞染色緩沖液、Hoechst 染色液和 PI 染色液冰浴或 4℃染色 20-30 分鐘,。染色后 PBS 洗滌一次,，再在熒光顯微鏡下觀察。

注意事項(xiàng)：

1. 需使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行紅色和藍(lán)色雙熒光檢測,。也可使用熒光顯微鏡檢測,。

2. 染色后宜盡快檢測,。

3. Hoechst 33342 對人體有害，碘化丙啶(PI)對人體有刺激性,，請注意適當(dāng)防護(hù),。

4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

保存條件：

4℃保存六個(gè)月有效,，-20℃保存一年有效。Hoechst 染色液和 PI 染色液需避光保存