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細(xì)胞膜蛋白,、胞漿蛋白/核蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：26141

產(chǎn)品規(guī)格：50次/100次

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

  本試劑盒用于分離提取真核細(xì)胞的細(xì)胞膜蛋白,、胞漿蛋白/核蛋白。

產(chǎn)品內(nèi)容：

操作步驟：

1. 收集 10 6-5×10 6 個(gè)細(xì)胞于 1.5ml 離心管中,，用 PBS 清洗,。

2. 將細(xì)胞重新懸浮于 250-500μl Harvest buffer 中，冰上孵育 5min,。

3. 1000rpm 離心 10min,，收集上清至新離心管中，同時(shí)留沉淀,。

4. 12000rpm 離心 15min,，收集上清至新離心管中（此部分溶液包含胞漿蛋白和膜蛋白）。

5. 將步驟 3 中沉淀重懸于 500μl Buffer A 中,，1000rpm 離心 5min,，棄上清。

6. 加入 4 倍體積 Buffer C,，4℃渦旋（或反復(fù)渦旋/冰上孵育）15min,。

7. 4℃，12000rpm 離心 10min,。 8. 收集上清至新離心管中（此部分溶液包含核蛋白）,。

注意事項(xiàng)：

1. 需自備 PMSF,。PMSF 一定要在抽提試劑加入到樣品中前 2-3min 內(nèi)加入，以免 PMSF 在水溶液中很快 失效,。PMSF 可以向本公司訂購(gòu),。

2. 抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或 4ºC 進(jìn)行。

3. 本試劑盒對(duì)于細(xì)胞樣品,，僅適合于真核細(xì)胞,。

4. 使用本試劑盒抽提到的蛋白可直接用本公司生產(chǎn)的 BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度。但不適合 用 Bradford 法測(cè)定蛋白濃度,。

5. 本產(chǎn)品*于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品,，不得存放于 普通住宅內(nèi),。

6. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。