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MTT 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(500 次)

產(chǎn)品貨號(hào)：P20311

產(chǎn)品規(guī)格：500次

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

  MTT 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用 于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè),。MTT 可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物 Formazan,。在特 定溶劑存在的情況下，可以被*溶解,。然后通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定 570nm 波長(zhǎng)附近的吸光度,。細(xì)胞增殖越多越快， 則吸光度越高,；細(xì)胞毒性越大,，則吸光度越低。

  本試劑盒采用了*的 Formazan 溶解液配方,，無(wú)需去除原有的培養(yǎng)液,，可以直接加入 Formazan 溶解液溶解 Formazan。從而避免了由于去除培養(yǎng)液時(shí) Formazan 被部分去除而引起的誤差,。

  本試劑盒本底低,，靈敏度高，線性范圍寬，使用方便,。

  本試劑盒可以測(cè)定 500 個(gè)樣品。

包裝清單:

操作步驟：

1. 通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入 100μl 2000 個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入 100μl 5000 個(gè)細(xì)胞(具體每 孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。按照實(shí)驗(yàn)需要,，進(jìn)行培養(yǎng)并 給予 0-10μl 特定的藥物刺激,。

2. 每孔加入 20μl MTT 溶液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育 4 小時(shí),。

3. 每孔加入 100μl Formanzan 溶解液,，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育。直至在普通光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn) Formazan 全部溶解,。通常 37℃孵育 4 小時(shí)左右,，紫色結(jié)晶會(huì)全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少,，溶解 的時(shí)間會(huì)短一些,。如果紫色結(jié)晶較大較多，溶解的時(shí)間會(huì)長(zhǎng)一些,，建議室溫或 37℃過(guò)夜孵育,。

4. 在 570nm 測(cè)定吸光度。如無(wú) 570nm 濾光片,，可以使用 560-600nm 的濾光片,。

注意事項(xiàng) ：

1. 由于使用 96 孔板進(jìn)行檢測(cè)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),，一定要注意蒸發(fā)的問(wèn)題,。一方面，由于 96 孔板周圍一 圈容易蒸發(fā),，可以采取棄用周圍一圈的辦法,，改加 PBS、水或培養(yǎng)液,；另一方面,，可以把 96 孔板置于靠 近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā),。

2. MTT 溶液在 4℃,、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固，可以 20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

3. Formazan 溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時(shí)可以 37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解,，并且必須在全部溶解并混勻后使用,。混 勻過(guò)程請(qǐng)用移液槍輕輕吹勻,，勿上下顛倒,，避免氣泡。

4. 為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操