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Bradford 蛋白濃度測定試劑盒

產(chǎn)品貨號：T16005

產(chǎn)品規(guī)格：500 次/1000 次

產(chǎn)品簡介：

  Bradford 蛋白濃度測定試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)是根據(jù)常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一 Bradford 法研制而成,，實現(xiàn)了蛋白濃度測定的快速,，穩(wěn)定和高靈敏度。檢測速度極快,，10-20 個樣品只需不足 10 分鐘即可完成,。靈敏度高,，檢測濃度下限達(dá)到 25μg/ml，小檢測蛋白量達(dá)到 0.5μg,，待測樣品體積為 1-20μl,。在 50-1000μg/ml 濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。  

  Bradford 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,。樣品中β-巰基乙醇的濃度 可高達(dá) 1M,，二 硫蘇糖醇的濃度可高達(dá) 5mM。但受略高濃度的去垢劑影響,。需確保 SDS 低于 0.01%,，Triton X-100 低于 0.05%， Tween 20,60,80 低于 0.015%,。含去垢劑的樣品*使用 BCA 蛋白濃度測定試劑盒,。

包裝清單：

操作步驟：

1. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備

  *融化蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，取 10μl 稀釋至 100μl,，使終濃度為 0.5mg/ml,。蛋白樣品在什么溶液中，標(biāo)準(zhǔn)品也宜用 什么溶液稀釋,。但是為了簡便起見,，也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

2. 蛋白濃度測定

a. 將標(biāo)準(zhǔn)品按 0,、1,、2、4,、8,、12、16,、20μl 加到 96 孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中,，加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補足到 20μl， 相 當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為 0,、0.025、0.05,、0.1,、0.2、0.3,、0.4,、0.5mg/ml。

b. 加適當(dāng)體積樣品到 96 孔板的樣品孔中,。如果樣品不足 20μl,，需加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補足到 20μl,。請注意記錄 樣品體積。

c. 各孔加入 200μl Bradford 溶液,，室溫放置 3-5 分鐘,。

d. 用酶標(biāo)儀測定 A595，或 560-610nm 之間的其它波長的吸光度,。

e. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和使用的樣品體積計算出樣品中的蛋白濃度,。

注意事項：

1. Bradford 溶液使用前請顛倒 3-5 次，混勻,。

2. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)請在全部溶解后先混勻,，再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標(biāo)準(zhǔn)。

3. 將 Bradford 溶液恢復(fù)到室溫再使用,，有利于提高檢測的靈敏度,。

4. 需可檢測 560-610nm 之間波長的酶標(biāo)儀一臺，*檢測波長為 595nm,。并需 96 孔板,。

5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

保存條件：

Bradford 溶液 4℃保存,，蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存，本試劑盒自訂購之日起九個月內(nèi)有效,。