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桿粒提取試劑盒

Bacmid Extraction Kit

產(chǎn)品貨號：P0123

產(chǎn)品規(guī)格：100 次/200 次 

產(chǎn)品簡介：

  適用于大量從DH10Bac轉化株提取重組桿粒pFastBac。純化后的桿粒DNA使用PCR檢驗或者進行轉染,。

產(chǎn)品內(nèi)容:

操作步驟：

1. 5ml 離心管 12000rpm 離心 1min 收集細胞,。

2. 真空吸干上清，0.3ml 的 Solution 1 重懸沉淀,，輕輕地震蕩或上下混勻,。

3. 0.3ml 的 Solution 2 輕輕混勻，室溫孵育 5min,。注意：懸浮的沉淀應該從渾濁到幾乎半透明,。

4. 緩慢加入 0.3ml KAC，加入過程中輕輕混勻,，冰上放置 5-10min,。

5. 12000rpm 離心 10min。

6. 輕輕將上清轉移到含有 0.8ml 異丙醇的離心管,，不要吸到白色沉淀,，顛倒混勻，冰上孵育 5-10min,。

7. 室溫 12000rpm 離心 15 min,。

8. 小心棄去上清，不要浮起沉淀,，加入 0.5ml Wash Buffer,，顛倒離心管數(shù)次清洗沉淀。

9. 室溫 12000rpm 離心 5 min,。重復 8 和 9,。

10. 輕輕吸棄上清,，室溫 5-10 min 干燥沉淀，不要過分干燥,。注意：勿使用真空離心選裝蒸發(fā)儀去干燥 DNA,。

11. 40μl End Solution重新溶解DNA沉淀，為避免剪切,，勿機械重懸DNA,，讓溶液順管子輕輕流下溶解DNA。

注意事項：

1. 不*純化的桿粒 DNA 存在-20℃,，因為反復凍融會剪切 DNA,。

2. 分析重組桿粒 DNA（PCR 鑒定重組桿粒 DNA）或轉染昆蟲細胞。