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DNA 純化試劑盒
產(chǎn)品貨號:27100
產(chǎn)品規(guī)格:50 次/100 次/200 次
產(chǎn)品簡介: 本試劑盒采用新型硅基質(zhì)膜技術(shù)和試劑配方,,通過快速簡單的結(jié)合-洗滌-洗脫三步即可從 PCR 產(chǎn)物或酶反應(yīng) 液(酶切,,連接,探針標(biāo)記等)中純化回收 70 bp-30 kb 的 DNA 的片段,,每個(gè)吸附柱可吸附 10μg 的 DNA,,同 時(shí)更大限度的去除引物、寡核苷酸,、酶等雜質(zhì),。純化回收的 DNA 純度及濃度高,完整性好,,回收率高,,可直接 用于測序、連接和轉(zhuǎn)化,、標(biāo)記,、體外轉(zhuǎn)錄等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
包裝清單:
產(chǎn)品名稱 | 50次包裝 | 100次包裝 | 200次包裝 | 儲存條件 |
---|---|---|---|---|
Buffer PG | 15ml | 30ml | 55ml | 室溫 |
Buffer PS | 15ml | 25ml | 45ml | 室溫 |
Buffer PW | 10ml | 18ml | 36ml | 室溫 |
Buffer EB | 5ml | 10ml | 20ml | 室溫 |
Spin Columns | 50個(gè) | 100 個(gè) | 200 個(gè) | 室溫 |
Collection Tubes | 50個(gè) | 100 個(gè) | 200 個(gè) | 室溫 |
自備試劑:50 次自備 36ml 無水乙醇/100 次自備 72ml 無水乙醇/100 次自備 144ml 無水乙醇
操作步驟:
1. 將估計(jì) DNA 反應(yīng)液的體積,,加入 5 倍體積的 Buffer PG,,充分混勻(無需去除石蠟油或礦物油),。 注意:如 DNA 反應(yīng)體系為 50µl(不包括石蠟油體積),則加入 250 µl Buffer PG,。
2. 柱平衡:向已裝入收集管(Collection Tubes)中的吸附柱(Spin Columns)中加入 200μl Buffer
3. PS,,12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的廢液,,將吸附柱重新放回收集管中,。
4. 將步驟 3 或 4 所得溶液加入到已裝入收集管的吸附柱中,室溫放置 2 分鐘,,12000 rpm 離心 1 分鐘,,倒掉收 集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中,。
5. 向吸附柱中加入 450 μl Buffer PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),,12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收 集管中的廢液,,將吸附柱放回收集管中,。 注意:如果純化的 DNA 用于鹽敏感的實(shí)驗(yàn)(例如平末端連接或直接測序),建議加入 Buffer PW 靜置 2-5 分鐘再離心,。
6. 重復(fù)步驟 4,。
7. 12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的廢液,。
注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除,,乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶促反應(yīng)(酶切、PCR 等),。 將吸附柱放到一個(gè)新的 1.5 ml 離心管(自備)中,,向吸附膜中間位置懸空滴加 50μlBuffer EB,室溫放置 2 分鐘,。 12000 rpm 離心 1 分鐘,,收集 DNA 溶液。-20℃保存 DNA,。
注意事項(xiàng):
1. *使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在 Buffer PW 中加入無水乙醇,。
2. 所有離心步驟均可室溫下進(jìn)行。
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