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細(xì)胞活力/毒性檢測(cè)試劑盒
(超高靈敏型 CCK-8 試劑盒)
超高靈敏型 CCK-8 細(xì)胞活力測(cè)定試劑盒是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性相對(duì)定量及定量檢測(cè)的 快速、高靈敏度試劑盒,,比傳統(tǒng)的 MTT,、XTT 及 CCK-8 方法具有更好的檢測(cè)靈敏度和更寬的線性范圍。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
本試劑盒檢測(cè)非常便捷,。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的超高靈敏型 CCK-8 溶液,,無須再進(jìn)行任何配制等操作。 無須使用同位素,,所有的檢測(cè)步驟僅在同一塊 96 孔板內(nèi)完成,。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,,也不必采用額外 的步驟去溶解反應(yīng)生成物,,可用于大批量樣品的高通量檢測(cè)。
使用方法:
1. 使用 96 孔板,,細(xì)胞培養(yǎng)和處理完畢,。
2. 逐孔加入超高靈敏型 CCK-8 試劑,每孔 100μl 培養(yǎng)基中加入 10μl 超高靈敏型 CCK-8 試劑,。
3. 培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱,,37℃孵育 1~4 小時(shí)。
4. 于 490nm 處測(cè)定 OD 值,。
5. 結(jié)果分析 將各測(cè)試孔的 OD 值減去對(duì)照孔 OD 值,。各平行孔的 OD 值取平均數(shù)。 細(xì)胞活力% =(加藥細(xì)胞 OD-空白 OD)/(對(duì)照細(xì)胞 OD-空白 OD)×*
6. 若使用除 96 孔外的培養(yǎng)板,試劑用量按照培養(yǎng)基體積等比例增減,。
使用注意事項(xiàng):
1. 試劑加入后需輕輕振搖培養(yǎng)板,,使超高靈敏型 CCK-8 試劑與培養(yǎng)基充分混勻。
2. 試劑加入后培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔細(xì)胞數(shù)量的多少而異,。對(duì)于貼壁細(xì)胞,,加入超高靈敏型 CCK-8 的培養(yǎng)時(shí)間一般為 1~4 小時(shí),但在培養(yǎng) 30 分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度(根據(jù)細(xì)胞種類而定),。 與貼壁細(xì)胞相比,,懸浮細(xì)胞較難顯色。對(duì)于懸浮細(xì)胞,,在加入超高靈敏型 CCK-8 培養(yǎng) 1~4 小時(shí)后,,可先從 培養(yǎng)箱中取出,目測(cè)染色程度或用酶標(biāo)儀測(cè)定,。若顯色困難,,可以將培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱,繼續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時(shí)后 再確定,。
3. 如果實(shí)驗(yàn)中有還原劑,,需要檢查背景的 OD 值,即在不含細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入藥物,,然后加入超高靈敏型 CCK-8 試劑在一定時(shí)間內(nèi)檢測(cè),,和不加藥物的培養(yǎng)基進(jìn)行比較(只加超高靈敏型 CCK-8 試劑),如果 OD 值明顯偏高,,則說明有反應(yīng),。
4. 若細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色或pH發(fā)生變化,建議更換新鮮培養(yǎng)基后再加入超高靈敏型CCK-8試劑,。 含有酚紅的培養(yǎng)基不影響本試劑的使用,。
5. 如果樣品為高渾濁度的細(xì)胞懸液,建議設(shè)定 600nm(或 600nm 以上)作為參比波長(zhǎng),,扣除參比波長(zhǎng)的 OD 值即可,。
6. 如果要測(cè)定細(xì)胞的具體數(shù)量,需要先做一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
7. 若測(cè)得 OD 值過高,,可酌減鋪板細(xì)胞數(shù)或超高靈敏型 CCK-8 試劑用量。
8. 本試劑盒靈敏度高,,相比傳統(tǒng)的 CCK-8 法及 MTT、XTT 法,,建議起始細(xì)胞加樣數(shù)/培養(yǎng)數(shù)減半或更少,,其 他實(shí)驗(yàn)條件不變。如用 CCK-8 法時(shí)需加 4000 個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)后檢測(cè),用本試劑盒時(shí)僅需 2000 個(gè)細(xì)胞即可,。
9. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),,于 490nm 所測(cè)得 OD 值在 0.5-1.5 范圍內(nèi)為佳。
試劑包裝:
100 次:1ml×1 瓶,;
500 次:5ml×1 瓶,;
3,000 次:5ml×6 瓶;
10,000 次:100ml×1 瓶,;
貯藏條件:
超高靈敏型 CCK-8 在避光 0~5℃的條件下存放一年,,測(cè)定效果*不變。在-20℃的條件下可以貯存更久,。
本產(chǎn)品僅供科研使用,,不做其它用途。
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