產(chǎn)品貨號：R21807

產(chǎn)品規(guī)格：100T

產(chǎn)品簡介：

  尚寶生物生產(chǎn)的Hoechst33342/PI細胞凋亡染色試劑盒為您提供了一種經(jīng)典而又快速簡便的細 胞凋亡與細胞壞死檢測方法,。本試劑盒采用 Hoechst 33342 和碘化丙啶(Propidium Iodide,，PI)雙染的方 法。細胞發(fā)生凋亡時,，染色質(zhì)會固縮,。Hoechst33342 可以穿透細胞膜,，染色后凋亡細胞熒光會比正常細胞 明顯增強。碘化丙啶(PI)不能穿透細胞膜,，對于具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡細胞不能染色,。而對于 壞死細胞，其細胞膜的完整性喪失,，碘化丙啶(PI)可以染色壞死細胞,。上述兩種染料雙染后，使用流式細 胞儀或熒光顯微鏡檢測時,，正常細胞為弱紅色熒光＋弱藍色熒光,，凋亡細胞為弱紅色熒光＋強藍色熒光， 壞死細胞為強紅色熒光＋強藍色熒光,。參考下圖,，左圖為誘導(dǎo)凋亡前的正常細胞，右圖為誘導(dǎo)凋亡后的細 胞,。

染色快速方便,，兩種染料的染色僅需 20-30 分鐘，一步染色即可完成,。使用方便,，使用流式細胞儀檢測 時，無需稀釋等配制過程,，也無需再準備其它任何溶液,。本試劑盒足夠檢測 100 個樣品，每個樣品的細胞 數(shù)量可以為 1×10 5-1×10 6,。

產(chǎn)品內(nèi)容：

操作步驟：

1. 每個樣品收集約 10-100 萬細胞于 1.5ml 離心管內(nèi),，離心棄上清。細胞沉淀用 0.8-1ml 細胞染色緩沖液 重懸,。

2. 加入 5 微升 Hoechst 染色液,。

3. 加入 5 微升 PI 染色液。

4. 混勻,，冰浴或 4℃孵育 20-30 分鐘,。

5. 用流式細胞儀檢測紅色熒光和藍色熒光。

6. 如果使用熒光顯微鏡檢測,，檢測前離心沉淀細胞,，用 PBS 洗滌一次，再涂片觀察紅色熒光和藍色熒光,。 對于貼壁細胞使用熒光顯微鏡檢測,，可以不收集細胞，直接依次按照上述比例加入細胞染色緩沖液,、Hoechst 染色液和 PI 染色液冰浴或 4℃染色 20-30 分鐘,。染色后 PBS 洗滌一次,，再在熒光顯微鏡下觀察。

注意事項：

1. 需使用流式細胞儀進行紅色和藍色雙熒光檢測,。也可使用熒光顯微鏡檢測,。

2. 染色后宜盡快檢測。

3. Hoechst 33342 對人體有害,，碘化丙啶(PI)對人體有刺激性,，請注意適當防護。

4. 為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

保存條件：

4℃保存六個月有效，-20℃保存一年有效,。Hoechst 染色液和 PI 染色液需避光保存