乳酸檢測試劑盒（乳酸脫氫酶比色法）

產(chǎn)品貨號：BA1698

產(chǎn)品規(guī)格：50T

產(chǎn)品簡介：

乳酸(Lactic acid,，LD)又稱2-羥基丙酸是一種化合物,，是一種含有羥基的羧酸,，分子式是C₃H₆O₃,，參與生物化學(xué)很多反應(yīng)過程,。乳酸檢測有化學(xué)氧化法,、酶催化法,、電化學(xué)法,、酶電極感應(yīng)器法。其中,，酶催化法是使用乳酸脫氫酶(LDH)催化乳酸氧化,，生成丙酮酸和NADH，通過分光光度法或熒光光度法測定NADH的生成量,，進(jìn)而計算出乳酸含量,。

乳酸檢測試劑盒(乳酸脫氫酶比色法)其檢測原理是在NAD存在條件下，乳酸脫氫酶(LDH)催化乳酸生成丙酮酸,，同時生成NADH,。在堿性條件下顯色劑與丙酮酸生成復(fù)合物，并使平衡偏向乳酸氧化為丙酮酸的方向,，驅(qū)動反應(yīng)完成,，生成的NADH與乳酸為等量摩爾。通過分光光度比色法測定340nm處吸光度,，據(jù)此通過比色分析就可以計算出LD水平,。該試劑盒可用于檢測細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿,、血清等樣品中內(nèi)源性的乳酸含量,。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途,。

產(chǎn)品組成：

需自備的儀器和用品：

離心管或小試管,、蒸餾水,、水浴鍋或恒溫箱、比色杯,、分光光度計,。

操作步驟：

1. 準(zhǔn)備樣品：

血漿、血清,、尿液及其他體液樣品：血漿,、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定，尿液通常也可以直接用于測定,，-20℃凍存,。

細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液，如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,，低速離心取上清,，-20℃凍存，用于LD的檢測,。

高濃度樣品：如果樣品中含有較高濃度的LD,，可以使用原有的裂解液或PBS等進(jìn)行稀釋，如雞血清,、血漿可稀釋5～10倍后檢測,。

2. 配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液：取乳酸標(biāo)準(zhǔn)(20mmol/L)0.1ml溶解于0.3ml乳酸標(biāo)準(zhǔn)稀釋液，使?jié)舛冗_(dá)到5mmol/L,，即為標(biāo)準(zhǔn)品工作液-乳酸標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L),。4℃避光保存2個月有效。

3. LD檢測：按照下表設(shè)置空白管,、對照管,、標(biāo)準(zhǔn)管、測定管,，溶液應(yīng)按照順序依次加入,，并注意避免產(chǎn)生氣

泡。如果樣品中的LD濃度過高,，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定,。樣品的檢測最好能設(shè)置平行管。

4. 用分光光度計檢測,，以蒸餾水調(diào)零，比色杯光徑1.0cm，讀取空白管,、對照管,、標(biāo)準(zhǔn)管,、測定管的340nm吸光度(即A_空白,、A_對照、A_{標(biāo)準(zhǔn)},、A_測定),，一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。 

計算結(jié)果： 

血清,、血漿,、尿液、腦脊液乳酸(mmol/L)=｛(A_測定?A_對照)/(A_{標(biāo)準(zhǔn)}?A_空白)｝×5

組織乳酸(mmol/g)=｛(A_測定?A_對照)/(A_{標(biāo)準(zhǔn)}?A_空白)｝×5/待測樣品蛋白濃度(g/L)

式中：A_測定=測定管的吸光度值

A_對照=對照管的吸光度值

A_{標(biāo)準(zhǔn)}=標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度值

A_空白=空白管的吸光度值

參考區(qū)間： 

健康成年人安靜狀態(tài)空腹靜脈血      0.6～2.2mmol/L

健康成年人安靜狀態(tài)空腹動脈血      0.3～1.47mmol/L

健康成年人尿液乳酸排出量       5.5～22mmol/d

新生兒毛細(xì)血管血                  1.2～4.4mmol/L

0～16 兒童腦脊液                  1.1～2.8mmol/L

注意事項：

1. 本法適用于自動分析儀,，分別監(jiān)測測定管和標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度升高速率,，計算乳酸的濃度。

2. 如果沒有分光光度計,，也可以使用酶標(biāo)儀測定,。

3. 抗凝劑用肝素鈉-氟化鈉較好?？鼓獦悠分糜诒≈兴蜋z,，盡快分離出血漿等。

4. 草酸抗凝劑對LDH有一定的抑制作用,。

5. 為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

有效期：6個月有效,。