類胡蘿卜素（Carotenoid）檢測(cè)試劑盒（微板法）

產(chǎn)品貨號(hào)：BA1645

產(chǎn)品規(guī)格：100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

葉綠體是光合作用的細(xì)胞器,，在光合作用研究中,，常需要用提取的葉綠體展開(kāi)下游研究工作。葉綠體中所含的色素主要有兩大類,，葉綠素(包括葉綠素a和葉綠素b)和類胡蘿卜素(包括胡蘿卜素和葉黃素),，它們與類囊體膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合，成為色素蛋白復(fù)合體,，其中葉綠素又稱葉綠體色素(Chlorophyll),。類胡蘿卜素是一種脂溶性且具有營(yíng)養(yǎng)特性的化合物，給植物和動(dòng)物提供天然色素,，是重要的抗氧化劑,，并有能力轉(zhuǎn)換為必需維生素。類胡蘿卜素可預(yù)防細(xì)胞,，組織和基因損毀，增強(qiáng)身體免疫系統(tǒng),，抵御感染,，減少癌癥風(fēng)險(xiǎn)，保護(hù)心臟,。

類胡蘿卜素(Carotenoid)檢測(cè)試劑盒(微板法)檢測(cè)原理是類胡蘿卜素不溶解于水,，而溶于有機(jī)溶劑，以有機(jī)溶劑粗提類胡蘿卜素,，根據(jù)朗伯-比爾定律,，某有色溶液的吸光度(A)與其中溶質(zhì)濃度(C)和液層厚度(L)成正比，即 A=αCL,，其中α為比例常數(shù),，當(dāng)溶液濃度以百分比濃度為單位，層液厚度為1cm時(shí),，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù),。在本試劑盒情況下，葉綠素a,、葉綠素b,、類胡蘿卜素在665nm 、649nm,、470nm處有最大吸收波,，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式可計(jì)算出葉綠素a、葉綠素b,、總?cè)~綠素,、類胡蘿卜素含量。該試劑盒主要用于植物組織中葉綠素,、類胡蘿卜素的提取以及以分光光度計(jì)定量檢測(cè)葉綠素a,、葉綠素b、總?cè)~綠素,、類胡蘿卜素含量,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途,。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1. 研缽或勻漿器

2. 離心管

3. 濾紙或紗布

4. 96孔板,、酶標(biāo)儀

操作步驟 (僅供參考) ：

1. 類胡蘿卜素提?。?/span>

①取菠菜或其他植物新鮮葉片，洗凈，擦干,，去中脈,，稱取剪碎的新鮮樣品0.1g，置于研缽或勻漿器,，加入少量提取粉劑(約50mg)和1ml Carotenoid Assay buffer,，研磨或勻漿成液態(tài)。

②將研磨液或勻漿液轉(zhuǎn)移至10ml離心管,，用少量Carotenoid Assay buffer沖洗研缽或勻漿器數(shù)次,，最后連殘?jiān)煌谷?/span>10ml離心管，補(bǔ)加Carotenoid Assay buffer至10ml,，混勻,，避光放置5min-2h。

（注：也可將組織剪碎,，加入Carotenoid Assay buffer，避光放置12~36h,，期間晃動(dòng)數(shù)次，使組織與提取試劑充分接觸,，當(dāng)組織接近白色，即表示色素提取完成,，可直接進(jìn)行測(cè)定。）

2. 觀察底部組織殘?jiān)咏诎咨?，即為提取,，如果仍有較多組織顏色,，應(yīng)再加入Carotenoid Assay buffer繼續(xù)避光放置,。

3. 濾紙或三層紗布過(guò)濾,，留取濾液，即為類胡蘿卜素粗提液。

4. Carotenoid測(cè)定：取類胡蘿卜素粗提液加入96孔板,，以Carotenoid Assay buffer調(diào)零,，酶標(biāo)儀測(cè)定粗提液在665nm、649nm,、470nm處吸光度(A₆₆₅,、A₆₄₉、A₄₇₀),。

計(jì) 算：

葉綠素a含量(mg/g)=C_a×V×N/(W×1000)

葉綠素b含量(mg/g)=C_b×V×N/(W×1000)

總?cè)~綠素含量(mg/g)=C_T ×V×N/(W×1000)

類胡蘿卜素含量(mg/g)=C_C×V×N/(W×1000)

式中：C_a=13.95×A₆₆₅-6.88×A₆₄₉(mg/L)

C_b=24.96×A₆₄₉-7.32×A₆₆₅(mg/L)

C_T=6.63×A₆₆₅+18.08×A₆₄₉(mg/L)

C_C=(1000×A₄₇₀-2.05×C_a -114.8×C_b)/245(mg/L)

=(1000×A₄₇₀-2851.304×A₆₄₉+811.7385×A₆₆₅)/245(mg/L)

V=類胡蘿卜素粗提液體積(ml)=10(ml)

N=稀釋倍數(shù)

W=樣品鮮重或干重(g)

1000=ml與L的單位換算

注意事項(xiàng)：

1. 為避免葉綠素和類胡蘿卜見(jiàn)光分解,，操作時(shí)應(yīng)盡量避光，研磨或勻漿時(shí)應(yīng)盡量縮短時(shí)間,。

2. 測(cè)定吸光度值大于1時(shí),，可適當(dāng)稀釋后再行測(cè)定。

3. Carotenoid Assay buffer易揮發(fā),，不用時(shí)需擰緊瓶蓋,。

4. 色素粗提液不能出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，否則應(yīng)重新過(guò)濾,。

5. 為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：12個(gè)月有效,。