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上海尚寶生物科技有限公司
初級會(huì)員 | 第5年

400-611-0007

Bradford蛋白濃度測定試劑盒

時(shí)間:2023/11/2閱讀:170
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Bradford蛋白濃度測定試劑盒

產(chǎn)品貨號:16005

 

產(chǎn)品規(guī)格:500/1000

 

產(chǎn)品簡介:

Bradford蛋白濃度測定試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)是根據(jù)的兩種蛋白濃度檢測方法之一Bradford法研制而成,,實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測定的快速,,穩(wěn)定和高靈敏度,。檢測速度極快,10-20個(gè)樣品只需不足10分鐘即可完成,。靈敏度高,,檢測濃度下限達(dá)到25μg/ml,最小檢測蛋白量達(dá)到0.5μg,待測樣品體積為1-20μl,。在50-1000μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系,。

Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M,,二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM,。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.01%,,Triton X-100低于0.05%,,Tween 20,60,80低于0.015%。含去垢劑的樣品推薦使用BCA蛋白濃度測定試劑盒,。

 

包裝清單:

產(chǎn)品名稱

500次包裝

1000次包裝

儲(chǔ)存條件

Bradford溶液

100ml

200ml

2-8

蛋白標(biāo)準(zhǔn)BSA (5mg/ml)

1ml

2ml

-20℃

 

操作步驟:

1. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備

融化蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,,取10μl稀釋至100μl,使終濃度為0.5mg/ml,。蛋白樣品在什么溶液中,,標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,,也可以用0.9%NaClPBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,。

2. 蛋白濃度測定

   a. 將標(biāo)準(zhǔn)品按01,、2,、48,、12,、1620μl加到96孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中,,加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20μl,,  相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為00.025,、0.05,、0.10.2,、0.3,、0.40.5mg/ml,。

   b. 加適當(dāng)體積樣品到96孔板的樣品孔中,。如果樣品不足20μl,需加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20μl,。請注意記錄樣品體積,。

   c. 各孔加入200μl Bradford溶液,室溫放置3-5分鐘。

   d. 用酶標(biāo)儀測定A595,,或560-610nm之間的其它波長的吸光度,。

   e. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和使用的樣品體積計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。

 

注意事項(xiàng):

1. Bradford溶液使用前請顛倒3-5次,,混勻,。

2. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)請?jiān)谌咳芙夂笙然靹颍傧♂尦梢幌盗胁煌瑵舛鹊牡鞍讟?biāo)準(zhǔn),。

3. Bradford溶液恢復(fù)到室溫再使用,,有利于提高檢測的靈敏度。

4. 需可檢測560-610nm之間波長的酶標(biāo)儀一臺(tái),,最佳檢測波長為595nm,。并需96孔板。

5. 為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

   

保存條件: 

     Bradford溶液4℃保存,蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存,,本試劑盒自訂購之日起12個(gè)月內(nèi)有效。

 


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