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Bradford蛋白濃度測定試劑盒
產(chǎn)品貨號:16005
產(chǎn)品規(guī)格:500次/1000次
產(chǎn)品簡介:
Bradford蛋白濃度測定試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)是根據(jù)的兩種蛋白濃度檢測方法之一Bradford法研制而成,,實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測定的快速,,穩(wěn)定和高靈敏度,。檢測速度極快,10-20個(gè)樣品只需不足10分鐘即可完成,。靈敏度高,,檢測濃度下限達(dá)到25μg/ml,最小檢測蛋白量達(dá)到0.5μg,待測樣品體積為1-20μl,。在50-1000μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系,。
Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M,,二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM,。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.01%,,Triton X-100低于0.05%,,Tween 20,60,80低于0.015%。含去垢劑的樣品推薦使用BCA蛋白濃度測定試劑盒,。
包裝清單:
產(chǎn)品名稱 | 500次包裝 | 1000次包裝 | 儲(chǔ)存條件 |
Bradford溶液 | 100ml | 200ml | 2-8℃ |
蛋白標(biāo)準(zhǔn)BSA (5mg/ml) | 1ml | 2ml | -20℃ |
操作步驟:
1. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備
融化蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,,取10μl稀釋至100μl,使終濃度為0.5mg/ml,。蛋白樣品在什么溶液中,,標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,,也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,。
2. 蛋白濃度測定
a. 將標(biāo)準(zhǔn)品按0、1,、2,、4、8,、12,、16、20μl加到96孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中,,加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20μl,, 相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為0、0.025,、0.05,、0.1、0.2,、0.3,、0.4、0.5mg/ml,。
b. 加適當(dāng)體積樣品到96孔板的樣品孔中,。如果樣品不足20μl,需加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20μl,。請注意記錄樣品體積,。
c. 各孔加入200μl Bradford溶液,室溫放置3-5分鐘。
d. 用酶標(biāo)儀測定A595,,或560-610nm之間的其它波長的吸光度,。
e. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和使用的樣品體積計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。
注意事項(xiàng):
1. Bradford溶液使用前請顛倒3-5次,,混勻,。
2. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)請?jiān)谌咳芙夂笙然靹颍傧♂尦梢幌盗胁煌瑵舛鹊牡鞍讟?biāo)準(zhǔn),。
3. 將Bradford溶液恢復(fù)到室溫再使用,,有利于提高檢測的靈敏度。
4. 需可檢測560-610nm之間波長的酶標(biāo)儀一臺(tái),,最佳檢測波長為595nm,。并需96孔板。
5. 為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
保存條件:
Bradford溶液4℃保存,蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存,,本試劑盒自訂購之日起12個(gè)月內(nèi)有效。
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