總膽固醇（TC）檢測試劑盒（COD-PAP單試劑微板法）

產品貨號：BA1762

產品規(guī)格：100T

產品簡介：

膽固醇(Cholesterol)又稱膽甾醇，是一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物,，廣泛存在于動物體內,，其中腦,、神經組織多,，在腎,、脾,、皮膚,、肝和膽汁中含量也較高。用酶學方法測定總膽固醇(Total Cholesterol,，TC)是生化檢測中的常用方法,，其特點是：1、靈敏度,、準確度,、精密度均高；2、使用溫和的反應條件,；3,、操作簡便；4,、適用于自動分析儀,。

總膽固醇（TC）檢測試劑盒（COD-PAP單試劑微板法）又稱膽固醇氧化酶法或膽固醇氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法等，血液中的膽固醇約1/3為游離膽固醇,，2/3為與脂肪酸結合的膽固醇酯,，后者被膽固醇酯酶(CEH)水解為游離膽固醇，游離膽固醇被膽固醇氧化酶(COD)氧化成膽甾烯酮,，并產生過氧化氫,，再經過氧化物酶(POD)催化，使4-氨基安替比林與酚(三者合稱PAP)反應,，生成紅色醌亞胺色素(Trinder反應),，分光光度計在500~520nm處進行比色測定。本試劑盒用于人或動物的血清,、血漿,、腦脊液、細胞,、組織等樣本中的總膽固醇含量定量測定,。本試劑盒僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途,。

產品組成：

自備材料：

1. 生理鹽水或PBS

2. 離心管,、小試管或96孔板

3. 水浴鍋或恒溫箱

4. 分光光度計或酶標儀

5. 全自動或半自動生化分析儀

操作步驟：

1. 樣本處理：

①血清,、血漿、腦脊液樣本：從待測樣本中分離出的血清或血漿不應有溶血,，直接檢測,，如超過線性范圍，用生理鹽水稀釋后檢測,。

②細胞樣本：

a,、取適量的細胞(一般推薦>10⁶以上)，1000g離心10min,，棄上清,，留取沉淀。

b,、用PBS或生理鹽水清洗1~2次,，1000g離心10min,，棄上清，留取沉淀,。

c,、加入200~300μl的PBS或生理鹽水勻漿，冰浴條件下超聲破碎細胞,，功率300W,，每次3~5s，間隔30s,，重復 3~5次,。亦可手動勻漿，制備好的勻漿液不可離心,；亦可用1~2% Triton X-100冰浴30~60min,，制備好的裂解液不可離心。

③組織樣本：準確稱取適量組織樣本,，按質量(g)：生理鹽水或PBS(ml)=1：9的比例,，加入生理鹽水或PBS，冰浴條件下手動或機械勻漿,。2500~3000g離心10min,，取上清。

2. TC測定

①各種儀器按上表依次加入試劑。充分混勻, 37℃水浴中孵育5min,。

②立即用相應儀器測定500~520nm吸光度,，以空白孔(管)調零，讀取標準孔(管),、測定孔(管)的吸光度,，分別記為A標準、A測定,。

機器參數：

計算公式：

血清,、血漿等液體樣本(空白調零)：

FC(mmol/L)= A測定/ A標準×5

血清、血漿等液體樣本(全自動生化分析儀)：

FC(mmol/L)= (A測定- A空白)/(A標準- A空白)×5

組織樣本(空白調零)：

FC(mmol/g)= A測定/ A標準×5×V₂ /( m ×1000)

組織樣本(全自動生化分析儀)：

FC(mmol/g)= (A測定- A空白)/(A標準- A空白)×5×V/( m ×1000)

細胞樣本(空白調零)：

FC(mmol/L)= A測定/ A標準×5×V₂ / V₁

細胞樣本(全自動生化分析儀)：

FC(mmol/L)= (A測定- A空白)/(A標準 - A空白)×5×V₂ / V₁

式中：m=組織樣本取樣量（g）

V₁ =細胞樣本取樣量（ml）

V₂ =樣本勻漿液總體積（ml）

參考區(qū)間：

健康成年人理想范圍：<5.2mmol/L(<200mg/dl)

邊緣升高：<5.23~5.69mmol/L(201~219mg/dl)

升高：≥5.72mmol/L(≥220mg/dl)

備注：TC標準(5mmol/L)=442.48mg/dl

性能指標：

注意事項:

1. 上述低溫試劑避免反復凍融,，以免失效或效率下降,。

2. COD-PAP工作液如不經常使用，應充分溶解后分裝-20℃保存,，可4℃短期保存,。

3. 本法可直接用于檢測腦脊液中的TC含量，但不能直接檢測尿液中的TC含量,，因為未經處理的尿液中含有還原性物質,，影響過氧化物酶反應。

4. 檢測TC的血清或血漿宜用EDTA或肝素抗凝,，如不能及時測定,，密閉保存，4℃可穩(wěn)定一周,，-20℃可以穩(wěn)定半年以上,。

5. 本法線性范圍可達13mmol/L，如果樣本TC濃度過高,，結果可能呈假性降低,，應用生理鹽水稀釋后重測，結果乘以稀釋倍數,。

6. 本試劑盒既可作終點法檢測,，又可作速率法檢測。

7. 本法不適于檢測游離膽固醇的濃度,。

保存條件：6個月有效,。4℃運輸，-20℃保存,。