三色染色是結(jié)締組織染色的經(jīng)典方法,，它是顯示組織中纖維的主要方法之一,，也是膠原纖維染色的經(jīng)典技術(shù)方法,。這種方法的染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透性有關(guān)：分子的大小是由分子量來反映的，小分子容易穿透結(jié)構(gòu)致密,、滲透性低的組織,；高分子量只能進入結(jié)構(gòu)松散、滲透性高的組織,。Masson三色染色試劑盒染色的膠原纖維,、粘液和軟骨呈藍色（如淡綠色溶液為綠色）；細胞質(zhì),、肌肉,、纖維素和神經(jīng)膠質(zhì)呈紅色；核為藍紫色,。
Masson三色染色試劑盒操作步驟：
1,、切片常規(guī)脫蠟至水，用制備好的魏格特鐵蘇木素染色5～10min,。
2,、用酸性乙醇分化液進行分化，用水洗滌。
3,、用馬松藍溶液回藍,，用水洗滌。
4,、用蒸餾水洗滌1分鐘,。
5、品紅品紅染色液5~10分鐘,。
6,、上述操作中，按蒸餾水：弱酸溶液=2：1的比例配制弱酸工作溶液,，用弱酸工作溶液洗滌1min,。
7、用磷鉬酸溶液洗滌1～2min,。
8,、用配制好的弱酸工作液洗滌1min。
9,、直接在苯胺藍染色液中染色1~2分鐘,。
10、用配制好的弱酸工作液洗滌1min,。
1,、95%乙醇的快速脫水。無水乙醇脫水3次,，每次5～10s。
12,、二甲苯透明3次,，每次1～2min。中性口香糖密封,。
Masson三色染色試劑盒注意事項：
1,、切片脫蠟應(yīng)盡可能干凈。固定起著重要作用,，使用不同的固色劑可以延長或縮短染色時間,。
2、取A1和A2等量混合,，即為魏格鐵蘇木素染色液,。一般24小時內(nèi)就會失去染色力。
3,、酸性乙醇的分化時間應(yīng)根據(jù)切片的厚度,、組織的種類和新舊程度來確定。
4、弱酸溶液可使顏色更清亮,。如大量使用,，可用0.1～0.3%的醋酸溶液代替。
5,、磷鉬酸分化應(yīng)在顯微鏡下控制,，膠原纖維和纖維可分化為淡紅色和紅色。分化時間取決于染色深度,，一般為1~2min,。
6、Masson藍液也可用Scott藍液或0.1～1%水溶液代替,。
