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4CN顯色試劑盒(HRP顯色)

時間:2021/9/1閱讀:779
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4CN顯色試劑盒(HRP顯色)

產(chǎn)品貨號:T15230

產(chǎn)品規(guī)格:100ml/500ml

產(chǎn)品簡介:

4CN4--1-萘酚的縮寫,,屬于辣根過氧化物酶(HRP)發(fā)色系統(tǒng),,與DAB,、TMB顯色原理類似,。

4CN顯色試劑盒(HRP發(fā)色)其顯色原理是4CN與氧化物形成紫色沉淀,,可以用于細(xì)胞或組織在免疫組化或原位雜交時結(jié)合的辣根過氧化物酶顯色,,也可用于Western等結(jié)合有辣根過氧化物酶的膜的顯色檢測,。

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品名稱

100ml

500ml

保存條件

試劑(A):4NC顯色液

100ml

500ml

4℃,,避光

試劑(B):4NC氧化劑

2×1ml

2×5ml

室溫

自備材料:

1. 洗滌液

2. 蒸餾水

操作步驟(僅供參考):

1. 常規(guī)組織切片、細(xì)胞樣品,、膜與辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后,,用適當(dāng)洗滌液洗滌。對于檢測內(nèi)源性辣根過氧化物酶的組織或細(xì)胞樣品,,在適當(dāng)固定后,,也可用洗滌液洗滌,。

2. 4CN顯色液:4CN氧化劑=比例混合,即為4CN顯色工作液,即配即用,。

3. 洗滌過組織后,,去除洗滌液,加入適量4CN顯色工作液,,確保覆蓋樣品,。

4. 室溫避光孵育30min或更長時間,直至顯色至預(yù)期深淺,。

5. 去除4CN顯色工作液,,用蒸餾水清洗即可終止顯色反應(yīng)。

6. 對組織切片或細(xì)胞樣品,,反應(yīng)終止后,,如有必要可用中性紅染色液染色,便于觀察,。對于膜染色,,反終止后可室溫晾干避光保存。

注意事項:

1. 4CN氧化劑易揮發(fā),,應(yīng)密閉保存,。

2. 顯色后易褪色,請注意避光,,以減少染料分解,。

3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

常見問題及可能原因:

1. 背景顯色太深

在免疫組化時如果背景顯色太深,,考慮使用適當(dāng)?shù)姆忾]液進行封閉,例如選購適當(dāng)?shù)姆忾]液或使用和一抗相同來源的血清(10%)進行封閉,。也應(yīng)請注意選購經(jīng)過適當(dāng)吸附的二抗,,以減小二抗的非特異性吸附。

在進行含內(nèi)源性過氧化氫酶的免疫組化時,,如果背景顯色太深,,需注意滅活內(nèi)源性過氧化氫酶??梢栽?/span>4體積甲醇中加入1體積3%過氧化氫,,混勻后用于內(nèi)源性過氧化氫酶的滅活。

可以考慮縮短顯色時間,,或降低二抗?jié)舛取?/span>

選擇適當(dāng)強度的洗滌液,,或延長洗滌時間。

2. 沒有顯色或顯色太弱

當(dāng)提高一抗或二抗的濃度,。檢測二抗效果,,滴一滴稀釋二抗在膜上,,檢測二抗是否可以被正常顯色,。

考慮使用更加靈敏的放大檢測體系,,例如使用生物素檢測體系。

適當(dāng)延長顯色時間,,另外確定抗原修復(fù)是否對于使用的一抗是必需的,。

有效期:6個月有效。


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