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超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)細(xì)胞破碎提取葉綠素的具體步驟

時間:2017-10-18 閱讀:2971
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  超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)細(xì)胞破碎提取葉綠素的具體步驟
  
  超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)是利用超聲波在液體中的分散效應(yīng),,使液體產(chǎn)生空化的作用,,從而使液體中的固體顆?;蚣?xì)胞組織破碎,。
  
  生物產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,應(yīng)用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)所做的實(shí)驗要求也隨之提高,,如對樣品溫度的測定,、控制,低溫冷卻樣品及整機(jī)的智能化程度的提高等等,,都提出了新的要求,。
  
  超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)超聲波細(xì)胞破碎提取葉綠素的具體步驟:
  
  1.以離心或過濾水樣,在抽濾器上裝好乙酸纖維濾膜。倒人定量體積的水樣進(jìn)行抽濾,抽濾時負(fù)壓不能過大(約為50kPa),。水樣抽完后,繼續(xù)抽1一2min,以減少濾膜上的水分,。如需短期保存1一2d時,可放人普通冰箱冷凍,如需長期保存(30d),則應(yīng)放人低溫冰箱(一20℃)保存。
  
  2.取出帶有浮游植物的濾膜,在冰箱內(nèi)低溫干燥6一8h,用剪刀剪碎后,放人5ml或10ml離心管中,加人3一4ml90%丙酮,使碎片浸人液面下,放人超聲波容器中用超聲波對樣品進(jìn)行細(xì)胞破碎,。(不同時間,、不同頻次來比較實(shí)驗,便于找出*破碎時間、頻次進(jìn)行方法統(tǒng)一),。
  
  3.將超聲波進(jìn)行細(xì)胞破碎的樣品用離心機(jī)(3000一4000r/min)離心10min,。將上清液倒人5ml或10ml容量瓶中。用90%的丙酮定容為5ml或10ml,搖勻,。
  
  4.將上清液在分光光度計上,用1cm光程的比色皿,分別讀取750nm,663nm,645nm,630nm波長的吸光度,并以90%的丙酮作空白吸光度測定,對樣品吸光度進(jìn)行校正,。

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