BD流式細(xì)胞儀的工作原理
閱讀:824 發(fā)布時間:2023-2-13
BD流式細(xì)胞儀采用流式細(xì)胞術(shù)是一種對處在液流中的細(xì)胞或其它生物微粒如細(xì)菌)逐個進(jìn)行多參數(shù)的快速定量分析和分選的技術(shù),。
工作原理是:將待測細(xì)胞經(jīng)特異性熒光染料染色后放入樣品管中,,在氣體的壓力下進(jìn)入充滿勒液的流動室。在鞘液的約束下細(xì)胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,,形成細(xì)胞柱。該設(shè)備通常以激光作為發(fā)光源,。經(jīng)過聚焦整形后的光束,垂直照射在樣品流上,,被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下,,產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收,。光散射信號在前向小角度進(jìn)行檢測,,這種信號基本上反映了細(xì)胞體積的大小,;熒光信號的接受方向與激光束垂直,,經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個不同波長的熒光信號,。這些熒光信號的強度代表了所測細(xì)胞膜表面抗原的強度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度,,經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號,再通過模/數(shù)轉(zhuǎn)換器,,將連續(xù)的電信號轉(zhuǎn)換為可被計算機識別的數(shù)字信號,。計算機把所測量到的各種信號進(jìn)行計算機處理,將分析結(jié)果顯示在計算機屏幕上,,也可以打印出來,,還可以數(shù)據(jù)文件的形式存儲在硬盤上以備日后的查詢或進(jìn)一步分析。
本公司提供的二手BD流式細(xì)胞儀具有高度的熒光測量靈敏度,,一般以能檢測到單個微球上少標(biāo)有FITC或PE熒光分子數(shù)目來表示,一般現(xiàn)在FCM均可達(dá)到<600個熒光分子,。