BD流式細胞儀的工作原理
閱讀:708 發(fā)布時間:2023-2-13
BD流式細胞儀采用流式細胞術(shù)是一種對處在液流中的細胞或其它生物微粒如細菌)逐個進行多參數(shù)的快速定量分析和分選的技術(shù),。
工作原理是:將待測細胞經(jīng)特異性熒光染料染色后放入樣品管中,在氣體的壓力下進入充滿勒液的流動室,。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,形成細胞柱。該設(shè)備通常以激光作為發(fā)光源,。經(jīng)過聚焦整形后的光束,垂直照射在樣品流上,,被熒光染色的細胞在激光束的照射下,產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光,。這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收,。光散射信號在前向小角度進行檢測,這種信號基本上反映了細胞體積的大??;熒光信號的接受方向與激光束垂直,經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,,形成多個不同波長的熒光信號,。這些熒光信號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度,經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號,,再通過模/數(shù)轉(zhuǎn)換器,,將連續(xù)的電信號轉(zhuǎn)換為可被計算機識別的數(shù)字信號。計算機把所測量到的各種信號進行計算機處理,,將分析結(jié)果顯示在計算機屏幕上,,也可以打印出來,還可以數(shù)據(jù)文件的形式存儲在硬盤上以備日后的查詢或進一步分析,。
本公司提供的二手BD流式細胞儀具有高度的熒光測量靈敏度,,一般以能檢測到單個微球上少標(biāo)有FITC或PE熒光分子數(shù)目來表示,一般現(xiàn)在FCM均可達到<600個熒光分子。