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使用固相萃取儀時的注意事項

閱讀:538        發(fā)布時間:2023-7-20

我們在用固相萃取儀時,,面臨的一個問題就是:液體應該以什么速率過柱流出,,我的經(jīng)驗是,,要想效果好,,就要慢,,盡量慢。.
        對于固相萃取儀柱中的填料,,我們?nèi)绻植糠糯蟮乜?,能夠看到其實它們是有很多的空際,液體流通的渠道很多,,如果流得快,,相當比例的待測組分還來不及與填料充分作用就地從通道流失;所以要慢,,給它們一個充分作用的機會,。
        如何慢呢?一個竅門就是不要用配合抽氣機使用的所謂固相萃取儀器,而采用再普通不過的重力法,。利用重力的作用使液體向下流出,。在實驗速度上,重力法遠不如吸力法,,但是在實驗效果方面,,重力法遠比吸力法優(yōu)勝,,用吸力法只能得到譜帶吸附,用重力法卻能得到柱頭吸附,,在速度和效果兩者的平衡中,,我們還是傾向于優(yōu)先保證好的效果。
        舉例來說,,一個3ml500mg的C18小柱,,如果加甲醇活化,其甲醇全部流至篩板時間約為20分鐘,,而在過樣品液時,,25ml 的液體*多2小時可以流完,而且用重力法如果得當,,工作速率不比吸力法差很多,。因為我們可以充分利用空閑時間,用吸力法*須有人在旁邊守候,,而重力法由于不需要用電,,可以充分利用午休和晚上時間過柱,液體量大時接個堆疊接頭和延長管即可,,安排好實驗步驟,,工作效率一樣很高。另外,,重力法不需要抽氣機和固相萃取儀器,。
        在固相萃取儀條件選擇上,有人為了提高提取效率,,盡量多加液體,,或選擇填料量大的小柱,我覺得大可不*如此,。尤其在用重力法時,,由于效率高,很多情況下是柱頭吸附,,并不是所有的填料都在起作用,,填料多了不僅液體流出速度會更慢,而且在洗脫時的擴散會很明顯,。
        因此建議,,夠用就行,在能保證效率時,,填料盡量少,,加液也不宜多。
        固相萃取儀從原理上是色譜分離,但是在操作時*好只把它作為吸附萃取劑使用,,由于填料性質,、松緊常有差異,因此在實際實驗中不*因為追求效果的*佳化而設計出很復雜的洗脫程序,。
        在建立條件中,,我們應該盡量多利用現(xiàn)成的資料,盡快地建立起體系,,同時要對操作過于復雜的步驟保持警惕性,,在實驗效果,實驗速率和易操作性三者中取得平衡點,。
        固相萃取柱*好只用一.次,。因為從嚴格的意義上來說,很多物質的吸附是不可逆的,,一次吸附,, 無法洗脫,影響著下一次吸附,,雖然有人做過重復利用的實驗,,但是總體來說為了節(jié)省- -點經(jīng)費而大大增加了結果的不可靠性和不確定性,是很不合算的行為,。

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