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一、微生物實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)

1,、工作室要矮小平整,、光滑、無(wú)凹凸不平或棱角,、四壁及屋頂用不透水之材質(zhì),，便于擦洗及殺菌。

2,、室內(nèi)采光面積應(yīng)大,，從室外應(yīng)能看到室內(nèi)的情況。

3,、為保證無(wú)菌室的潔凈,，無(wú)菌室周圍需設(shè)緩沖走廊，走廊旁再設(shè)緩沖間,，其面積可小于無(wú)菌室,。

4、無(wú)菌室,、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及紫外燈,，殺菌紫外燈離工作臺(tái)以一米為宜，其電源開(kāi)關(guān)應(yīng)設(shè)在室外,。

5,、無(wú)菌室與緩沖間進(jìn)出口應(yīng)設(shè)推拉門(mén),，門(mén)與窗平齊，門(mén)縫要封緊,，兩門(mén)要錯(cuò)開(kāi),，以免空氣對(duì)流造成污染。

二,、使用無(wú)菌室注意事項(xiàng)

1,、無(wú)菌室要保持清潔整齊，室內(nèi)僅存放必要的檢驗(yàn)用品,，如：酒精燈,、酒精棉、火柴,、鑷子,、接種針、接種環(huán),、記號(hào)鉛等。

2,、室內(nèi)檢驗(yàn)用具及桌凳應(yīng)保持固定位置,，不隨便移動(dòng)。

3,、每2周用2%消毒液（二氧化氯等）水溶液擦拭工作臺(tái),、門(mén)、窗,、桌凳及地面,，然后用二氧化氯溶液噴霧消毒空氣或過(guò)氧乙酸熏蒸，紫外燈殺菌,。

4,、定期檢查室內(nèi)空氣無(wú)菌狀態(tài)，進(jìn)行細(xì)菌和霉菌的檢查,。

5,、無(wú)菌室殺菌前應(yīng)將所有物品置于操作之部位，然后打開(kāi)紫外燈殺菌半小時(shí),，時(shí)間一到,，關(guān)閉紫外燈待用。

6,、操作應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作規(guī)定進(jìn)行,，操作少說(shuō)話，不喧嘩,，以保持環(huán)境的無(wú)菌狀態(tài),。

三,、配制培養(yǎng)基注意事項(xiàng)

1、滅菌時(shí)嚴(yán)格按照規(guī)定加熱,、加壓,，切忌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)壓力過(guò)高，否則會(huì)造成營(yíng)養(yǎng)成分的破壞,。

2,、切忌使用銅鍋、鐵鍋配制培養(yǎng)基,。

3,、培養(yǎng)基不能二次高壓滅菌。

4,、劃線用培養(yǎng)基可放入冰箱或培養(yǎng)箱除去水分,。 

四、無(wú)菌操作注意事項(xiàng)

1,、進(jìn)入無(wú)菌室之前*行空氣消毒,，工作人員進(jìn)入無(wú)菌室以前，必須于緩沖間更換消毒過(guò)的工作服,、工作帽及工作鞋,。

2、動(dòng)作要輕,，盡量減少走動(dòng),，以免攪動(dòng)空氣。

3,、操作要靠近酒精燈火焰區(qū),，使用吸管要用吸球。

4,、接種環(huán)/接種針用前用后進(jìn)行火焰滅菌,。

5、工作結(jié)束作好終末消毒,，所有培養(yǎng)物均應(yīng)高壓滅菌后再扔掉,，以免污染環(huán)境。

五,、菌落總數(shù)測(cè)定注意事項(xiàng)

1,、選取樣品要有代表性，如為固體樣品要多采幾個(gè)部位,，液體檢樣要混勻,。

2、每次做樣從開(kāi)始到結(jié)束都要進(jìn)行超凈臺(tái)空氣凈度的監(jiān)測(cè),，同時(shí)對(duì)所有滅菌物品做空白對(duì)照,。

3,、為減少稀釋倍數(shù)的誤差，在做連續(xù)遞增稀釋時(shí),，每一稀釋液應(yīng)充分振搖使其均勻,，同時(shí)每一稀釋度換一支吸管。

4,、在進(jìn)行連續(xù)稀釋時(shí),，應(yīng)將吸管內(nèi)液體沿壁流入，勿使吸管觸及稀釋液,。

5,、傾倒?fàn)I養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板時(shí)，溫度要在46±1℃之間,，數(shù)量要在15ml左右為宜,，不要太多太少。

6,、培養(yǎng)物48h培養(yǎng)后培養(yǎng)基失重不超過(guò)15%,，培養(yǎng)箱內(nèi)要放水。

7,、檢樣加入平皿后應(yīng)立即傾注培養(yǎng)基并旋轉(zhuǎn)混勻,，一般從稀釋到傾注不超過(guò)20分鐘。

8,、平皿內(nèi)如有鏈狀菌落生長(zhǎng)時(shí)：菌落之間無(wú)明顯界限且僅有一條鏈可視為一個(gè)菌落，如為不同來(lái)源的幾條鏈則將每條鏈各做一個(gè)菌落記,。

9,、做菌落記數(shù)時(shí)平板里所有的菌落都要記數(shù)。

六,、大腸菌群注意事項(xiàng)

1,、對(duì)乳糖膽鹽管產(chǎn)氣的觀察只要有氣泡往上冒就算產(chǎn)氣。

2,、在伊紅美蘭瓊脂平板上挑取菌落時(shí)一定要選典型菌落,。

七、霉菌,、酵母菌檢驗(yàn)注意事項(xiàng)

1,、稀釋樣品時(shí)用無(wú)菌水。

2,、3天觀察時(shí)把所有的酵母菌做標(biāo)記,。

3、如果有霉菌被培養(yǎng)出,，請(qǐng)不要把皿蓋隨便打開(kāi),，待培養(yǎng)物高壓滅菌后再清洗,。

八、壞包分析注意事項(xiàng)

1,、對(duì)已開(kāi)包的酸包脹包要馬上轉(zhuǎn)移到無(wú)菌瓶中,，已防二次污染。

2,、根據(jù)壞包的不同表現(xiàn)狀態(tài)適當(dāng)?shù)倪x擇培養(yǎng)項(xiàng)目,。

3、做微生物培養(yǎng)的同時(shí)測(cè)定感官,、理化指標(biāo),，注意其有何變化。

九,、商業(yè)無(wú)菌注意事項(xiàng)

1,、要求有厭氧培養(yǎng)的一定要在厭氧環(huán)境下培養(yǎng)。

2,、取樣測(cè)pH值,，要與同批正常樣相比，看是否有顯著差異,。

3,、對(duì)pH 值有可疑的樣品都要做涂片染色鏡檢，與同批正常樣相比,，看是否有明顯的微生物增殖現(xiàn)象,。

4、保溫期間出現(xiàn)的脹包,，漏包,、或開(kāi)包發(fā)現(xiàn)PH、感官異常,、變質(zhì),，進(jìn)一步鏡檢發(fā)現(xiàn)有異常數(shù)量細(xì)菌的樣品均應(yīng)進(jìn)行劃線培養(yǎng)。