為細(xì)胞換液時(shí),,要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入,,而不是直接加到細(xì)胞中,,以免損傷細(xì)胞,當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞株較為脆弱時(shí)尤其需要注意,。
使用無菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時(shí),,每支吸管只能使用一次,以免交叉污染,。
在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中,,換液是一項(xiàng)非常常規(guī)操作,,它主要是為了清除細(xì)胞在生長過程中產(chǎn)生的各種代謝廢物,補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基,,促進(jìn)細(xì)胞生長,。那么,如何更換細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的溶液呢,?
1,、將器材放入超凈臺(tái),打開紫外照射滅菌,,若是培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)溫度比較敏感,,可以將含血清的培養(yǎng)基瓶放入37℃的水浴箱使得培養(yǎng)基溫度在37℃,再轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)紫外滅菌,。另外,,細(xì)胞培養(yǎng)間也需要紫外照射半小時(shí)左右。
2,、從培養(yǎng)箱取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒,轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái),,打開蓋子,,輕輕吸出舊的培養(yǎng)液,可用移液器加入新鮮含血清培養(yǎng)基,,注意一定不要從細(xì)胞貼壁面加入培養(yǎng)基,,應(yīng)從側(cè)壁加,動(dòng)作輕柔,,以免沖落細(xì)胞,。
3、加好培養(yǎng)基后,,蓋上蓋子,,在瓶子上做標(biāo)記,注明換液時(shí)間,,細(xì)胞種類,,操作人員等信息。
4,、放入培養(yǎng)箱之前應(yīng)再次用酒精噴一噴瓶子表面,,然后應(yīng)記得整理操作臺(tái),用酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面,,清理廢液和垃圾,。
在進(jìn)行換液操作時(shí),全程注意無菌,,操作人員要穿好滅菌服,,戴好滅菌手套和口罩,,手接觸到細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶口時(shí)一定要小心,避免造成污染,。
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