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Precellys：研磨蜱蟲提取可培養(yǎng)的活體細(xì)菌
疾病從老鼠傳播到人體通常通過(guò)與老鼠排泄物直接接觸,、在受污染的環(huán)境或者通過(guò)體外寄生蟲例如蜱蟲（硬蜱屬Ixodes sp）等方式,。尤其在野生老鼠中會(huì)通常遇到三宿主蜱蟲,，它們已經(jīng)被證明了攜帶紅孢子蟲屬Anaplasma sp和巴貝西蟲屬Babesia sp兩種病原體,。這些病原體通常在環(huán)境中可以找到,，例如芽孢桿菌和類芽孢桿菌都是普遍存在的,，近一些稀有的病原體在臨床實(shí)驗(yàn)中也被發(fā)現(xiàn),，它們會(huì)引起一些人類傳染病,。
人類居住地通過(guò)人類活動(dòng)產(chǎn)生的廢棄物通常會(huì)吸引野生嚙齒動(dòng)物，這有助于蜱蟲病原體的傳播,。
正因?yàn)槿绱?，一些研究機(jī)構(gòu)開始從野生嚙齒動(dòng)物收集蜱蟲，研究蜱蟲體外可培養(yǎng)的活體細(xì)菌,。
實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)方案
捕獲嚙齒動(dòng)物（馬來(lái)西亞雪蘭莪州森林）,，并鑒定種類如表1所示。
收集捕獲嚙齒動(dòng)物體外的蜱蟲,。從形態(tài)學(xué)上鑒定老鼠體外收集的飽滿的成年蜱蟲,。
研磨之前使用70%的乙醇以及去核酸酶的水對(duì)收集的蜱蟲單獨(dú)進(jìn)行清洗消毒,，確保清除環(huán)境中的污染物。
清洗過(guò)的蜱蟲放在Precellys24中研磨,，研磨管選擇Precellys® Lysing kit CK28, ref. P000911-LYSK0-A.0（2.8mm陶瓷珠）,，研磨管中加500ulPBS，研磨程序?yàn)檗D(zhuǎn)速5500rpm,，研磨時(shí)間40s,。
研磨之后的蜱蟲接種到含有5%綿羊血的哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基上，在37℃有氧的條件下培養(yǎng)48小時(shí),。
細(xì)菌培養(yǎng)純化獲得單個(gè)的克隆,，通過(guò)16S rDNA測(cè)序來(lái)鑒定。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
通過(guò)16S rDNA,，ctpA測(cè)序和生物化學(xué)檢測(cè),，在老鼠（Sundamys muelleri大巽他鼠屬）如圖1中A所示中收集飽滿的成年雌性蜱蟲如圖1B和C所示鑒別出一種*/無(wú)二的細(xì)菌分離物Paenibacillus lautus，屬于類芽孢桿菌的一種,。
P. lautus分離物對(duì)阿米卡星,，環(huán)丙沙星，亞胺培南和美羅培南十分敏感,，同時(shí)對(duì)氨芐青霉素,、青霉素、克林霉素,、氯霉素,、利福平、*氧芐磺胺甲惡唑以及紅霉素和慶大霉素有一定抗性,。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
Precellys 24結(jié)合正確的研磨管和研磨條件可以從蜱蟲或感染的組織樣品中提取可培養(yǎng)的細(xì)菌,，確保在研磨之后可繼續(xù)培養(yǎng)。
人體被蜱蟲咬過(guò)之后,，蜱蟲體外攜帶的P. lautus細(xì)菌可能會(huì)引起疾病,。為了減少野生嚙齒動(dòng)物對(duì)人類居住地的影響，在公共娛樂(lè)場(chǎng)所應(yīng)有組織監(jiān)督廢物的處理,。