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恒溫恒濕培養(yǎng)箱怎樣測定水中土壤菌群
許多客戶朋友關(guān)于恒溫恒濕培養(yǎng)箱是怎樣測定水中土壤菌群的不是很清楚,,我們就來給我們做出了詳細(xì)的介紹,,快來學(xué)習(xí)一下吧。
1、測定過程
水樣的搜集,,用無菌采樣瓶搜集被測樣品,,在采樣過程中,要保護瓶口和瓶頸,,防止這些部分受雜菌污染,。瓶內(nèi)要留下足夠的空間,以備測定之前搖晃,。若搜集的水中有余氯,,應(yīng)于采樣前在無菌操作下于無菌采樣瓶中加人滅過菌的硫代硫酸鈉,加人量為每升水樣約0.1g,。水樣搜集后應(yīng)立即進行測定,,如果2h內(nèi)不能進行測定,應(yīng)把水樣放在冰箱中,,于4℃~10℃保存,,保存時間不宜逾越24h。經(jīng)冷凍保存后的水樣需測守時,,從冰箱中取出于30℃左右活化4h~5h,,再進行測定。
無菌箱(室)滅菌,,把實驗所用的無菌稀釋水,、無菌培養(yǎng)皿、無菌吸管等用品放人無菌箱(室)內(nèi),,翻開紫外線燈滅菌30min,。水樣的稀釋和接種,關(guān)掉紫外線燈,,翻開熒光燈,,將待測水樣放人無菌箱(室)中,立即用百分之75的乙醇溶液浸泡的醫(yī)用脫脂棉球擦手,,點著無菌箱(室)內(nèi)的酒精燈,。
以下對水樣的稀釋和接種條的操作應(yīng)在無菌箱(室)內(nèi)的火焰區(qū)進行。
挑選合適的稀釋度,,應(yīng)使后一個稀釋度接種后培養(yǎng)皿中成長的菌落數(shù)小于300個,,在空白稀釋水樣瓶上標(biāo)上稀釋度數(shù)。
另取一支5mL無菌吸管汲取5mL10-1水樣移人到di二個稀釋水中,,充分搖勻,,此時稀釋度為10~2,依次類推,,直至需求的稀釋度停止,。將不同稀釋度的水樣分別接種到無菌培養(yǎng)皿中,,每個稀釋度重復(fù)接種3~5個皿,每皿接種1mL,,接種時左手掌托住培養(yǎng)皿,,大拇指和食指悄悄將培養(yǎng)皿提起,吸管與培養(yǎng)皿底成45°角相接,。移開吸管時吸管不宜再碰到培養(yǎng)皿,。接種時間不宜逾越4s。每接種一個稀釋度替換一支無菌吸管,。另取一組培養(yǎng)皿不接水樣,,作為空白。一起操作,。將滅過菌的培養(yǎng)基冷卻至(45士1)℃,,掀開培養(yǎng)皿蓋,將培養(yǎng)基灌入培養(yǎng)皿內(nèi),,每皿應(yīng)灌15mL~20mL。灌皿時不要使培養(yǎng)基直接灌在水樣上,,灌皿后要將融化的培養(yǎng)基和皿中水樣*混合,,小心勿使混合液濺到培養(yǎng)皿的邊沿,測定一個水樣從接種到灌皿不得逾越20min,。
2,、培養(yǎng)
待培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基固化后,倒置平皿,,在恒溫恒濕培養(yǎng)箱中29℃培養(yǎng)72h,。