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蘭格實驗室注射泵助力微流控細(xì)胞膜電穿孔技術(shù)實現(xiàn)分子遞送
閱讀:765發(fā)布時間:2023-1-18
向細(xì)胞內(nèi)遞送DNA探針和質(zhì)粒等功能分子來探索細(xì)胞內(nèi)的分子機(jī)制與操控細(xì)胞命運(yùn),,一直是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域目標(biāo)工作,。從小分子到如今火熱的核酸mRNA疫苗遞送都離不開藥物遞送技術(shù)。
然而,,由于大多數(shù)外源功能分子都帶有負(fù)電荷,,無法直接通過同樣帶有負(fù)電荷的細(xì)胞膜,阻礙了細(xì)胞內(nèi)分子機(jī)制的探索與細(xì)胞功能的改造,。
基于微流控芯片的細(xì)胞電穿孔技術(shù)
目前,,生物醫(yī)學(xué)已開發(fā)了多種方法輔助功能分子進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)。其中,,電穿孔技術(shù)作為一種通用的細(xì)胞內(nèi)遞送工具,,指在外部增加短時強(qiáng)電脈沖時,細(xì)胞膜會形成瞬時微孔,,大多數(shù)外源功能分子可以進(jìn)出細(xì)胞,。
近年來,隨著微流控技術(shù)的發(fā)展,,基于微流控芯片的細(xì)胞電穿孔技術(shù)提高了傳統(tǒng)電穿孔的效率,。微流控芯片中微電極的間距短,產(chǎn)生同樣的電場強(qiáng)度只需幾伏至十幾伏的電壓,,避免了傳統(tǒng)電穿孔中超高壓帶來的各種問題,。同時,消耗樣品及試劑更少,,降低實驗成本,。
此外,在連續(xù)流動環(huán)境中細(xì)胞膜通透性的阻抗檢測達(dá)到了更高的靈敏度,。電穿孔技術(shù)在微流控相助下遞送效率,、劑量均勻性和細(xì)胞安全性方面均獲得了顯著提高。
應(yīng)用案例
美國麻省理工學(xué)院機(jī)械工程院采用HeLa細(xì)胞進(jìn)行電穿孔實驗,,由于電穿孔產(chǎn)生的細(xì)胞膜孔洞非常微小且不穩(wěn)定,,因此采用綠色熒光蛋白進(jìn)行電穿孔的表征,利用細(xì)胞內(nèi)的熒光強(qiáng)度程度反映電穿孔效果,。
為了更好記錄電穿孔的完整動態(tài)過程以及提高實驗效率,,設(shè)計了基于微流控細(xì)胞遞送平臺。在交流電壓下有效導(dǎo)入熒光蛋白的活細(xì)胞超過總數(shù)50%,,保持高達(dá)90%的細(xì)胞活力,,成功實現(xiàn)了細(xì)胞電穿孔。

該系統(tǒng)主要包括纖維狀摩擦電納米發(fā)電機(jī)(FS-TENG),、基于納米通道的器件,、微流控芯片和微量注射泵。
微量注射泵在微流控中作為動力源,通過機(jī)械裝置推動注射器,,可實現(xiàn)高精度,,平穩(wěn)的液體傳輸。該實驗過程中采用了蘭格的LSP02-1B注射泵以200μL/min輸送低電導(dǎo)率細(xì)胞懸液,,有效保護(hù)細(xì)胞的同時進(jìn)一步輔助細(xì)胞電穿孔,,實現(xiàn)了細(xì)胞電穿孔動態(tài)過程的實時跟蹤。
"麻省理工學(xué)院機(jī)械工程專業(yè)Dr. Liu表示:“與其他品牌注射泵相比,,蘭格公司的LSP02-1B實驗室注射泵非常適合于微流控相關(guān)的應(yīng)用,。它流量范圍寬泛,滿足多種實驗條件,。流量平穩(wěn),,精度高,且操作簡便,,有助于提高實驗效率,。"

蘭格提供多種實驗室注射泵,一直致力于為生命科學(xué),、生物醫(yī)藥,、研發(fā)、分析檢測等領(lǐng)域科研工作者提供更好的解決方案,。
蘭格dLSP 500數(shù)字型實驗室注射泵支持精確分配,,在注射泵的驅(qū)動下,液體流動時脈動小,、平穩(wěn)性好,,在微流控系統(tǒng)中可提供穩(wěn)定的微液流。
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