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液相色譜柱的柱長及內(nèi)徑的選擇
閱讀：1705 發(fā)布時(shí)間：2020-11-25
液相色譜柱在使用前，要進(jìn)行柱的性能測試,，并將結(jié)果保存起來,，作為評價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行,，只有這樣,，測得的結(jié)果才有可比性。
液相色譜柱的柱長及內(nèi)徑的選擇：
長度的選擇：柱越長,，總柱效越高(n值越大),，柱越長，分析時(shí)間也越長,。250—300mm是普遍的柱長,，實(shí)驗(yàn)室一半以上的工作都是采用此規(guī)格柱子，一般用來分離l0到50個(gè)組份的中等至復(fù)雜混合物,；500—600mm,，要求較高分辨率的應(yīng)用，—般用來分離大于50個(gè)組份或包含有難分離物質(zhì)的復(fù)雜樣品程序升溫分析,。
內(nèi)徑：柱效率與柱半徑平方成反比,，內(nèi)徑越小柱效越高，但內(nèi)徑越大,，柱容量也增加,，允許進(jìn)樣量就越多。當(dāng)進(jìn)樣量超過柱容量時(shí),，則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立真正的平衡,，將會導(dǎo)致色譜蜂畸變，柱分辨率降低，重現(xiàn)性不好,。因此對于復(fù)雜樣品需要準(zhǔn)確分離,，必須使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,，為了增加樣品容量就必須使用內(nèi)徑大的柱子,，目前實(shí)驗(yàn)室使用常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。
一般選擇原則：分析大分子量化合物選擇大孔徑,；對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,，以改善峰形，延長使用壽命等,。
現(xiàn)在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目,，根據(jù)參數(shù)可以給我們提供一個(gè)初步的選擇，但由于各個(gè)儀器廠商的填料技術(shù)和鍵合技術(shù)都有差異,，即使都是C18柱,，同一品牌不同系列都有不同的功能，有能耐受低pH值的,、有耐高溫的,、有適合堿性樣品的等等。所以在選擇前要好好研究參數(shù),，仔細(xì)閱讀說明書,，才能找到合適的色譜柱和適宜的分離方法。