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熒光檢測器的兩個特征光譜

閱讀:3277        發(fā)布時間:2020-8-7

  熒光檢測器(Fluorescence Detector,簡稱FLD)是 高壓液相色譜儀常用的一種檢測器,。選擇性高,,靈敏度也高。激發(fā)波長和發(fā)射波長是熒光檢測的必要參數(shù),。選擇合適的激發(fā)波長和發(fā)射波長,,對檢測的靈敏度和選擇性都很重要,尤其是可以較大程度地提高檢測靈敏度,。

  熒光涉及光的吸收和發(fā)射兩個過程,,因此任何熒光化合物,都有兩種特征的光譜:激發(fā)光譜(excitation spectrum)和發(fā)射光譜(emission spectrum),。

  激發(fā)光譜

  熒光屬于光致發(fā)光,,需選擇合適的激發(fā)光波長(Ex)以利于檢測。激發(fā)波長可通過熒光化合物的激發(fā)光譜來確定,。激發(fā)光譜的具體檢測辦法是通過掃描激發(fā)單色器,,使不同波長的入射光激發(fā)熒光化合物,產(chǎn)生的熒光通過固定波長的發(fā)射單色器,,由光檢測元件檢測,。終得到熒光強度對激發(fā)波長的關(guān)系曲線就是激發(fā)光譜。在激發(fā)光譜曲線的大波長處,,處于激發(fā)態(tài)的分子數(shù)目多,,即所吸收的光能量也多,能產(chǎn)生至強的熒光,。當考慮靈敏度時,,測定應(yīng)選擇大激發(fā)波長。

    發(fā)射光譜

  一般所說的熒光光譜,,實際上僅指熒光發(fā)射光譜。它是在激發(fā)單色器波長固定時,,發(fā)射單色器進行波長掃描所得的熒光強度隨熒光波長(即發(fā)射波長,,Em)變化的曲線,。熒光光譜可供鑒別熒光物質(zhì),并作為熒光測定時選擇合適的測定波長的依據(jù),。

  另外,,由于熒光測量儀器的特性,使光源的能量分布,、單色器的透射率和檢測器的響應(yīng)等性能會隨波長而變,,所以同一化合物在不同的儀器上會得到不同的光譜圖,且彼此間無類比性,,這種光譜稱為表觀光譜,。要使同一化合物在不同的儀器上能得到具有相同特性的熒光光譜,則需要對儀器的上述特性進行校正,。經(jīng)過校正的光譜稱為真正的熒光光譜,。

  激發(fā)波長和發(fā)射波長是熒光檢測的必要參數(shù)。選擇合適的激發(fā)波長和發(fā)射波長,,對檢測的靈敏度和選擇性都很重要,,尤其是可以較大程度地提高檢測靈敏度。

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