產(chǎn)品簡(jiǎn)介
TG1 來(lái)源于 E. coli K-12 菌株,,是目前生長(zhǎng)速度最快的克隆用大腸桿菌菌株,,在平板上 37 ℃培養(yǎng)時(shí),
7 h 可見克隆,。主要的噬菌體展示用菌株,,同時(shí)也可用于普通質(zhì)粒的構(gòu)建,lacIqZΔM15 的存在使其
可以用于藍(lán)白斑篩選等實(shí)驗(yàn),;但不含核酸酶 endA1 突變,,體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時(shí)推薦使
用質(zhì)粒提取試劑盒中配備的去蛋白液以去除菌體內(nèi)大量的核酸酶,。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè),,TG1
感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
TG1
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:[F' traD36 proAB lacIqZΔM15]supE thi-1 Δ(lac-proAB) Δ(mcrB-hsdSM)5 (rK– mK–)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存,;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,,置于冰浴中融化,;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,,冰上孵育 30 min,;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),,熱激 90s 后,,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),,后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min,;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜,。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10,;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可,;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,,整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔,。