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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡介
BLR 來源于 BL21，是 recA 重組m缺陷型菌株,，同時也是 Lon 和 OmpT 蛋白m缺陷型菌株,。
BLR(DE3)含有溶源的 λDE3 序列，可表達(dá) T7 RNA 聚合酶,，故適用于 pET 系列載體及其他 T7 啟動
子系列的載體,。此外,，該菌株可以顯著提升質(zhì)粒單體的產(chǎn)量，從而有助于提高含有重復(fù) DNA 序列
的質(zhì)粒的穩(wěn)定性,，也能提高那些容易導(dǎo)致噬菌體 DE3 序列丟失的質(zhì)粒的穩(wěn)定性,。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)
化檢測，BLR (DE3)感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107 cfu/μg DNA,。
產(chǎn)品組成
組分
BLR (DE3)
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型： F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal lac ile dcm Δ(srl-recA)306::Tn10 (TetR) (DE3)
存儲條件
-80 ℃保存,；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留,；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化,；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,，輕輕彈勻,，冰上孵育 30 min,；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動,，熱激 90s 后,，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱）,，后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min,；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜,。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10,；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可,；
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔
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