詳細(xì)介紹
分子生物學(xué)級(jí)超純水經(jīng)過去離子,反滲,,蒸餾和0.10微米過濾,,無(wú)檢測(cè)到的DNA酶、RNA酶和蛋白酶活性,,能大限度的免除DNA和RNA的降解,。
分子生物學(xué)級(jí)超純水1、細(xì)胞培養(yǎng)基
基礎(chǔ)Eagle培養(yǎng)基(Basal Medium Eagle),,1955年Eagle設(shè)計(jì),,BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素。簡(jiǎn)單,、便于添加,,適于各種傳代細(xì)胞系和特殊研究用,在此基礎(chǔ)上改良的細(xì)胞培養(yǎng)基品種有MEM,、DMEM,、IMDM等。
分子生物學(xué)級(jí)超純水
2,、MEM細(xì)胞培養(yǎng)基
又稱*Eagle培養(yǎng)基(Minimal Essential Medium),,1959年在Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)上修改而來(lái),刪去賴氨酸,、生物素,,氨基酸濃度增加,,適合多種細(xì)胞單層生長(zhǎng),有可高壓滅菌品種,,是一種1基本,、試用范圍的培養(yǎng)基,但因其營(yíng)養(yǎng)成分所限,,針對(duì)生產(chǎn)之特定細(xì)胞培養(yǎng)與表達(dá)時(shí),,并不一定是使用效果或者的培養(yǎng)基。
3,、DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基,,起初是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,,維生素濃度是MEM的4倍,,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。1初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,,后來(lái)為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要,,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了,。
低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,特別適用于生長(zhǎng)速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng),。高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,也適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來(lái)生長(zhǎng)點(diǎn)的克隆培養(yǎng),,也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng),。例如CHO細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)乙肝疫苗、CHO細(xì)胞表達(dá)EPO,。
4,、IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基
Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium,用于培養(yǎng)紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體,。此種培養(yǎng)液含有硒,、額外的氨基酸和維生素,、丙酮酸鈉和HEPES,。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進(jìn)小鼠B淋巴細(xì)胞,,LPS刺激的B細(xì)胞,,骨髓造血細(xì)胞,T細(xì)胞和淋巴瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),。IMDM為營(yíng)養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,,因此可以用于高密度細(xì)胞的快速增殖培養(yǎng),。
5、RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基分子生物學(xué)級(jí)超純水
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,,針對(duì)淋巴細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì),,含BSS+21種氨基酸+維生素11種等。現(xiàn)也用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,如哺乳動(dòng)物,、特殊造血細(xì)胞、正?;驉盒栽錾陌准?xì)胞,,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),其它像K-562,、HL-60,、Jurkat、Daudi,、IM-9等成淋巴細(xì)胞,、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。
6,、HamF10細(xì)胞培養(yǎng)基
1963年Ham設(shè)計(jì),,含微量元素,可在血清含量低時(shí)用,,適用于克隆化培養(yǎng),。F10適用于倉(cāng)鼠、人二倍體細(xì)胞,,特適于羊水細(xì)胞培養(yǎng),。
7、DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基
Ham's F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的,,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng),。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng),。由于營(yíng)養(yǎng)成分豐富,且可以使用較少血清,,故也常作為無(wú)血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,。
8、M199細(xì)胞培養(yǎng)基
1950年Morgan等設(shè)計(jì)的具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液,,即M-199,。除BSS外,含有53種成分,為全面培養(yǎng)基,,主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng),。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長(zhǎng)期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來(lái)源的細(xì)胞,,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞?,F(xiàn)廣泛用于病毒學(xué)、疫苗生產(chǎn),。
9,、McCoy5A培養(yǎng)基
1959年MeCoy為肉瘤細(xì)胞設(shè)計(jì),BSS+40種成分,??芍С侄喾N(如骨髓、皮膚,、肺和脾臟等)的原代移植物的生長(zhǎng),,除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外,主要用于作組織活檢培養(yǎng),、一些淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)支持,。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞,、HT-29,、BHL-100等上皮細(xì)胞。
10,、L15 細(xì)胞培養(yǎng)基
L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng),,用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤
0.25%胰酶 | 含酚紅,2.5g/L胰酶(1:250)溶于HBSS溶液,,不含鈣鎂,。-20℃保存。 |
0.25%胰酶 (溶于PBS) | 2.5g/L胰酶(1:250)溶于PBS溶液,,-20℃保存,。 |
0.25%胰酶 | 不含酚紅,含2.5g/L胰酶(1:250)溶于HBSS溶液,,不含鈣鎂,。-20℃保存。 |
0.25%胰酶+0.02% EYCA溶液 | 含酚紅,,含2.5g/L胰酶(1:250)溶于HBSS溶液,,0.02%EYCA溶于HBSS溶液,不含鈣鎂,。-20℃保存,。 |
0.25%胰酶+0.02% EYCA溶液 | 不含酚紅,含2.5g/L胰酶(1:250)溶于HBSS溶液,,0.02%EYCA溶于HBSS溶液,,不含鈣鎂。-20℃保存,。 |
0.05%胰酶+0.02% EYCA溶液(溶于PBS) | 2.5g/L胰酶(1:250)溶于PBS溶液,,,0.02%EYCA溶于PBS溶液,。-20℃保存,。 |
0.05%胰酶+0.02% EYCA溶液 | 含酚紅,0.5g/L胰酶(1:250)溶于HBSS溶液,,0.02%EYCA溶于HBSS溶液,,不含鈣鎂。-20℃保存,。 |
青霉素-鏈霉素溶液(100×) | 溶于0.85%NaCI溶液,,含青霉素10,000單位,鏈霉素10,000μg/ml。-20℃保存,。 |
抗菌-抗真菌劑 (100×) | 含青霉素10,000單位,鏈霉素10,000μg/ml,,25μg兩性霉素B。-20℃保存,。 |
青霉素G(100×) | 溶于0.85%NaCI溶液,,含青霉素10,000單位,-20℃保存。 |
PBS緩沖液 | 含 KH2PO4 , NaCl, Na2HPO4,。 pH 7.1-7.3,。15-30℃保存。 |
PBS緩沖液 | 含 KH2PO4 , NaCl, Na2HPO4,。 pH 6.7-6.9,。15-30℃保存。 |
PBS緩沖液 | 含 KH2PO4 , NaCl, Na2HPO4,。 pH 7.3-7.5,。15-30℃保存。 |
D-PBS緩沖液 | 不含鈣鎂,。pH 7.2-7.4,。15-30℃保存。 |
D-PBS緩沖液 | 含鈣鎂,。pH 7.2-7.4,。15-30℃保存。 |
D-PBS緩沖液 | 含鈣鎂,,葡萄糖,,丙酮酸鈉。pH 7.2-7.4。15-30℃保存,。 |
D-Hanks緩沖液(HBSS) | 含酚紅,。不含鈣鎂。pH 7.2-7.4,。15-30℃保存,。 |
D-Hanks緩沖液(HBSS) | 不含酚紅。不含鈣鎂,。pH7.2-7.4,。15-30℃保存。 |
Hanks緩沖液(HBSS) | 含酚紅,。含鈣鎂,。pH 7.2-7.4。15-30℃保存,。 |
Hanks緩沖液(HBSS) | 不含酚紅,。含鈣鎂。pH 7.2-7.4,。15-30℃保存,。 |
EBSS 緩沖液 | 不含酚紅。不含鈣鎂,。pH 7.2-7.4,。15-30℃保存。 |
Eagle’s液 | 含酚紅,。含鈣鎂,。pH 7.2-7.4。15-30℃保存,。 |
0.02% EYCA溶液 | 溶于D-PBS溶液,,0-5℃保存。 |
HEPES液(1M) | 含238.3g/L HEPES,。2-8℃保存,。 |
L-谷氨酰胺溶液(100×) | 200mM L-谷氨酰胺, 溶于0.85% NaCl溶液,-20℃保存,。 |
DMSO | 純度:>99.9%,。Millipore Millex-GN 濾膜過濾除菌 |
0.4%臺(tái)盼藍(lán) | 溶于0.85% NaCl 溶液。15-30℃保存,。 |
7.5%碳酸氫鈉溶液 | 含75g/L碳酸氫納,。15-30℃保存。 |
2-巰液乙醇溶液(1000X) | 55 m M in D-PBS,。 |
丙酮酸鈉溶液(100X) | 11004mg/L,。PH6.1-7.1,。2-8℃保存。 |
細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)超純水 | 經(jīng)過去離子,,反滲,,蒸餾和0.22微米過濾,使內(nèi)毒素含量降低到小于0.015EU/ml,,可用于培養(yǎng)液和溶液配制。 |
分子生物學(xué)級(jí)超純水 | 經(jīng)過去離子,,反滲,,蒸餾和0.10微米過濾,無(wú)檢測(cè)到的DNA酶,、RNA酶和蛋白酶活性,,能大限度的免除DNA和RNA的降解。 |
0.9%氯化鈉溶液 | 溶于細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)超純水Millipore 0.22μm濾膜過濾除菌 |
非必需氨液酸10mM(100X) | Prepared in diseilled water |
病毒采樣液 | 改良hanks液,,含2%牛血清白蛋白,,鏈霉素??敲顾?,兩性霉素。4ml/支 |