詳細介紹
Hanks緩沖液(HBSS)不含酚紅,。不含鈣鎂,。pH 7.2-7.4。15-30℃保存,。
Hanks緩沖液(HBSS1,、細胞培養(yǎng)基
基礎Eagle培養(yǎng)基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle設計,,BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素,。簡單、便于添加,,適于各種傳代細胞系和特殊研究用,,在此基礎上改良的細胞培養(yǎng)基品種有MEM、DMEM,、IMDM等,。
Hanks緩沖液(HBSS
2、MEM細胞培養(yǎng)基
又稱*Eagle培養(yǎng)基(Minimal Essential Medium),,1959年在Eagle's基礎培養(yǎng)基(BME)上修改而來,,刪去賴氨酸、生物素,,氨基酸濃度增加,,適合多種細胞單層生長,有可高壓滅菌品種,,是一種1基本,、試用范圍的培養(yǎng)基,但因其營養(yǎng)成分所限,,針對生產(chǎn)之特定細胞培養(yǎng)與表達時,,并不一定是使用效果或者的培養(yǎng)基。
3,、DMEM細胞培養(yǎng)基
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基,,起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,,維生素濃度是MEM的4倍,,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用,。1初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L,,這就是大家常說的低糖和高糖了。
低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng),。高糖更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng),也適用于附著性較差,,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),,也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養(yǎng)。例如CHO細胞表達生產(chǎn)乙肝疫苗,、CHO細胞表達EPO,。
4、IMDM細胞培養(yǎng)基
Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium,,用于培養(yǎng)紅細胞和巨噬細胞前體,。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素,、丙酮酸鈉和HEPES,。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞,,LPS刺激的B細胞,骨髓造血細胞,,T細胞和淋巴瘤細胞的生長,。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養(yǎng),。
5,、RPMI-1640細胞培養(yǎng)基D-Hanks緩沖液(HBSS
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,針對淋巴細胞培養(yǎng)設計,,含BSS+21種氨基酸+維生素11種等?,F(xiàn)也用于懸浮細胞培養(yǎng),如哺乳動物,、特殊造血細胞,、正常或惡性增生的白細胞,,雜交瘤細胞的培養(yǎng),,其它像K-562、HL-60,、Jurkat,、Daudi、IM-9等成淋巴細胞,、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用,。
6,、HamF10細胞培養(yǎng)基
1963年Ham設計,含微量元素,,可在血清含量低時用,,適用于克隆化培養(yǎng)。F10適用于倉鼠,、人二倍體細胞,,特適于羊水細胞培養(yǎng)。
7,、DMEM/F12細胞培養(yǎng)基
Ham's F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的,,現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產(chǎn)物,,這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)。由于營養(yǎng)成分豐富,,且可以使用較少血清,,故也常作為無血清培養(yǎng)基的基礎培養(yǎng)基。
8,、M199細胞培養(yǎng)基
1950年Morgan等設計的具有確定化學成分的細胞培養(yǎng)液,,即M-199。除BSS外,,含有53種成分,,為全面培養(yǎng)基,主要用于雞胚成纖維細胞培養(yǎng),。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng),。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細胞,并能培養(yǎng)轉染的細胞?,F(xiàn)廣泛用于病毒學,、疫苗生產(chǎn)。
9,、McCoy5A培養(yǎng)基
1959年MeCoy為肉瘤細胞設計,,BSS+40種成分??芍С侄喾N(如骨髓,、皮膚、肺和脾臟等)的原代移植物的生長,,除適于一般的原代細胞培養(yǎng)外,,主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞,、人淋巴細胞,、HT-29、BHL-100等上皮細胞,。
10,、L15 細胞培養(yǎng)基
L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細胞的培養(yǎng),用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤