詳細(xì)介紹
DMEM高糖培養(yǎng)液(1.5G/L碳酸氫鈉)
經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,其中 DMEM,、 RPMI 1640、 MEM ,、 DMEM/F12 都是應(yīng)用廣泛的培養(yǎng)基,。其他 如 M199 、 IMDM ,、 L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng),。其具體的特征及應(yīng)用如下:
DMEM高糖培養(yǎng)液(1.5G/L碳酸氫鈉)
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基,起初是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計的,。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用,。初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,,后來為了某些細(xì)胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,,這就是大家常說的低糖和高糖了,。
低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快,、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng),。高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,也適用于附著性較差,,但又不希望它脫離原來生長點(diǎn)的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng),。例如CHO細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)乙肝疫苗,、CHO細(xì)胞表達(dá)EPO。
DMEM高糖培養(yǎng)液(1.5G/L碳酸氫鈉)
至于選擇何種培養(yǎng)基并沒有一定的標(biāo)準(zhǔn),,有幾點(diǎn)建議可供參考:
(1)建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞的培養(yǎng)基,。可以查閱參考文獻(xiàn),,或在購買細(xì)胞株時咨詢,。也可以在一些生物公司的網(wǎng)站上搜索,如Invitrogen網(wǎng)站上有一個Cell Line Database的工具,,選擇你感興趣的細(xì)胞類型,,它就會彈出推薦的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,,有時還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟,,很方便,。
(2) 其它實驗室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,許多培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞,。
(3) 根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)